به بهبود ادامه دهید
| محل منبع: | چین |
|---|---|
| نام تجاری: | Green Spring |
| گواهی: | ISO13485,ISO9001 |
| شماره مدل: | LSY-10046 |
| مقدار حداقل تعداد سفارش: | 1 کیت |
| قیمت: | negotiable |
| زمان تحویل: | 7 تا 14 روز |
| شرایط پرداخت: | T/T |
| قابلیت ارائه: | 100000 تست در روز |
| عملکرد نمونه: | مرغ، گوشت خوک، اردک | حساسیت (ppb): | 0.5ppb |
|---|---|---|---|
| مشخصات: | 96 چاه / کیت | کلید واژه ها: | کیت تست MQCA ELISA |
| تایپ کنید: | کیت تشخیصی الایزا | ذخیره سازی: | در دمای 2-8 ℃، یخ زده نگهداری کنید. |
| برجسته کردن: | کیت الایزا تشخیصی MQCA 96 چاه / کیت,کیت الایزا تشخیصی مرغ,کیت تست گوشت خوک 0.5 Ppb 96 چاه / کیت |
||
کیت تست MQCA ELISA برای مرغ اردک خوک 96 چاه / حساسیت کیت 0.5ppb
1. اصل
این کیت تست مبتنی بر ایمونواسی آنزیمی رقابتی برای تشخیص MQCA در نمونه است.آنتی ژن های جفت کننده از قبل روی نوارهای ریز چاه پوشیده شده اند.MQCA در نمونه و آنتی ژن های جفت شده از پیش پوشش داده شده بر روی نوارهای ریز چاهک برای آنتی بادی ضد MQCA رقابت می کنند.پس از افزودن آنزیم مزدوج، بستر TMB برای رنگ‌آمیزی اضافه می‌شود.مقدار چگالی نوری (OD) نمونه با MQCA موجود در آن همبستگی منفی دارد.این مقدار با منحنی استاندارد مقایسه می شود و غلظت MQCA متعاقباً به دست می آید.
2. مشخصات فنی
حساسیت: 0.5ppb
دمای دستگاه جوجه کشی: 25 درجه سانتیگراد
زمان دستگاه جوجه کشی: 30 دقیقه تا 15 دقیقه
حد تشخیص:
بافت 1ppb
نرخ واکنش متقاطع:
MQCA 100%
Olaquindox <0.1٪
میزان بازیابی:
بافت 85% ± 10%
3. اجزاء
| 1 | نوارهای میکرو چاه | 12 نوار با 8 چاه قابل جابجایی هر کدام | |
| 2 | 6× محلول استاندارد (هر یک میلی لیتر) | 0ppb | 0.5ppb |
| 1.5ppb | 4.5ppb | ||
| 13.5ppb | 40.5ppb | ||
| 3 |
کنژوگه آنزیم غلیظ |
1 میلی لیتر | کلاه قرمز |
| 4 | محلول کار آنتی بادی | 8 میلی لیتر | کلاه آبی |
| 5 | بستر A | 7 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 6 | بستر B | 7 میلی لیتر | کلاه سیاه |
| 7 | راه حل را متوقف کنید | 7 میلی لیتر | کلاه زرد |
| 8 |
محلول حل مجدد |
50 میلی لیتر | کلاه شفاف |
| 9 | بافر شستشوی غلیظ 20× | 40 میلی لیتر | کلاه سفید |
4. مواد مورد نیاز اما ارائه نشده است
1) تجهیزات: میکروپلیت خوان (450 نانومتر / 630 نانومتر)، هموژنایزر، نوسان ساز، سانتریفیوژ، پیپت های اندازه گیری، دستگاه خشک کن نیتروژن و تعادل (حساسیت متقابل 0.01 گرم)، انکوباتور.
2) میکروپیپتورها: تک کانال 20 تا 200 میکرولیتر و 100 تا 1000 میکرولیتر و چند کاناله 300 تا 300 میکرولیتر.
3) معرفها: اتیل استات، n-هگزان، HCl، NaCl، CH3CN
5. نمونه قبل از درمان
دستورالعمل ها
نکات زیر باید قبل از انجام پیش درمان هر نوع نمونه رعایت شود:
1) فقط نوک های یکبار مصرف را می توان برای آزمایش ها استفاده کرد و هنگام استفاده برای جذب معرف های مختلف، نوک ها باید تغییر کنند.
2) قبل از انجام آزمایش، تمیز بودن هر ظروف آزمایشی باید بررسی شود و در صورت لزوم مجدداً تمیز شود تا از آلودگی هایی که با نتایج آزمایش تداخل می کند جلوگیری شود.
آماده سازی نمونه
1) عصاره نمونه (در دمای 2 ~ 8 درجه سانتیگراد به مدت 1 ماه نگهداری شود): 8.6 میلی لیتر HCl غلیظ را بردارید، آب یونیزه شده را به 500 میلی لیتر اضافه کنید، سپس 10 گرم نمک طعام اضافه کنید تا عصاره نمونه به دست آید.
5.1 بافت دام و طیور (مرغ، اردک، گوشت خوک):
1. 0.05±2 گرم از نمونه همگن شده را در لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتری بردارید.
2. 4 میلی لیتر عصاره نمونه را اضافه کنید، به مدت 1 دقیقه کاملا تکان دهید.
3. 4 میلی لیتر اتیل استات و 2 میلی لیتر CH3CN اضافه کنید، به مدت 10 ثانیه به درستی تکان دهید.با سرعت 4000 دور در دقیقه در دمای اتاق (20 تا 25 درجه سانتیگراد) به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید (توجه: این مرحله فقط به تکان دادن به مدت 10 ثانیه نیاز دارد، تکان دادن طولانی منجر به امولسیون شدن می شود، اگر امولسیون ظاهر شد، مایع رویی خاصی را بردارید، سپس لوله را به آرامی به مدت 5 ثانیه تکان دهید. ، دوباره سانتریفیوژ کنید سپس می توانید مایع رویی کافی دریافت کنید).
4. 3 میلی لیتر فاز آلی لایه بالا را در یک ظرف شفاف بردارید تا با نیتروژن یا هوا خشک شود.
حمام آب 56 ℃؛
5. 1 میلی لیتر N-هگزان اضافه کنید، به مدت 30 ثانیه تکان دهید، سپس 0.5 میلی لیتر محلول حل مجدد اضافه کنید، تکان دهید و به مدت 30 ثانیه کاملاً مخلوط کنید.با سرعت 4000 دور در دقیقه در دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) به مدت 5 دقیقه سانتریفیوژ کنید.
6. فاز آلی لایه بالا را بردارید. 50 میکرولیتر از لایه پایین برای تجزیه و تحلیل بردارید.
برابر رقت نمونه: 0.5
6. روش های الایزا
6.1 دستورالعمل
1) قبل از استفاده همه معرف ها و نوارهای ریز چاه را به دمای اتاق (20-25 ℃) برسانید.
2) بلافاصله پس از استفاده تمام معرف ها را به 2-8 ℃ برگردانید.
3) تکرارپذیری آنالیز ELISA تا حد زیادی به قوام شستشوی صفحه بستگی دارد.عملکرد صحیح شستشوی صفحه نکته کلیدی در روش های الایزا است.
4) برای انکوباسیون در دمای ثابت، تمام نمونه ها و معرف ها باید از قرار گرفتن در معرض نور اجتناب کنند و هر میکروپلیت باید توسط غشای پوششی مهر و موم شود.
6.2 رویه های عملیاتی
1) تمام معرف های لازم را خارج کرده و حداقل به مدت 30 دقیقه در دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) قرار دهید.توجه داشته باشید که هر معرف باید قبل از استفاده تکان داده شود تا یکنواخت مخلوط شود.
2) نوارهای ریز چاهک و قاب صفحه مورد نیاز را بردارید.میکروپلیت استفاده نشده را دوباره مهر و موم کنید، در دمای 2-8 ℃ ذخیره می شود.
3) آماده سازی محلول: 40 میلی لیتر از بافر شستشوی غلیظ 20× را با آب دیونیزه در 1:19 (1 قسمت 20× بافر غلیظ شستشو + 19 قسمت آب دیونیزه) رقیق کنید یا به مقدار لازم آماده کنید.
4) شماره گذاری: ریز چاه ها را با توجه به نمونه ها و محلول استاندارد شماره گذاری کنید.هر نمونه و محلول استاندارد باید در دو نسخه انجام شود.موقعیت های آنها را ثبت کنید.
5) محلول مخلوط محلول کار آنتی بادی و کنژوگه آنزیم غلیظ را تهیه کنید: محلول کار آنتی بادی و کنژوگه آنزیم غلیظ را به طور مساوی 10:1 مخلوط کنید (محلول کار آنتی بادی 1000 + کنژوگه آنزیم غلیظ 100 لیتر، این محلول مخلوط باید پس از تهیه استفاده شود، نمی توان آن را استفاده کرد. ذخیره شود، مقدار بسته دارای مقدار اضافی است، به نسبت مناسب است.)
6) 20 میکرولیتر نمونه یا محلول استاندارد را برای جداسازی چاهک های تکراری اضافه کنید، سپس 70 میکرولیتر محلول مخلوط محلول آنتی بادی و کنژوگه آنزیم غلیظ را به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن ملایم مخلوط کنید، میکروپلیت را با غشای پوششی ببندید و در دمای 25 درجه سانتیگراد در تاریکی به مدت 30 دقیقه انکوبه کنید.
7) میکروپلیت را با بافر شستشو با غلظت 250 میکرولیتر در چاه برای چهار تا پنج بار بشویید.چاه را با بافر شستشو به مدت 15 تا 30 ثانیه خیس کنید، با کاغذ جاذب بپوشانید تا خشک شود (اگر بعد از زدن حباب ها وجود داشت، آنها را با نوک تمیز برش دهید).
8) رنگ: 50 میکرولیتر از محلول بستر A و 50 میکرولیتر از محلول B را به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن به آرامی مخلوط کنید و در دمای 25 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه در تاریکی برای رنگ آمیزی انکوبه کنید.
9) تعیین: 50 میکرولیتر محلول توقف را به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن ملایم مخلوط کنید.برای تعیین مقدار OD، طول موج میکروپلیت خوان را روی 450 نانومتر تنظیم کنید.(توصیه می شود مقدار OD را در طول موج دوگانه 450/630 نانومتر در عرض 5 دقیقه بخوانید).
7. قضاوت نتیجه
دو روش برای قضاوت در مورد نتایج وجود دارد.اولی قضاوت تقریبی است، در حالی که دومی تعیین کمی است.توجه داشته باشید که مقدار OD نمونه با محتوای MQCA همبستگی منفی دارد.
7.1 تعیین کیفی
محدوده غلظت (ng/mL) را می توان از مقایسه میانگین مقدار OD نمونه با محلول استاندارد بدست آورد.با فرض اینکه مقدار OD نمونه Ⅰ 0.3 و مقدار نمونه Ⅱ 1.0 است، در حالی که محلول های استاندارد به شرح زیر است: 2.043 برای ppb 0، 1.716 برای ppb 0.5، 1.215 برای 1.5 ppb، 0.54. ppb، 0.313 برای 13.5 ppb و 0.155 برای 40.5 ppb، بر این اساس محدوده غلظت نمونه Ⅰ 13.5 تا 40.5ppb است، و نمونه Ⅱ 1.5 تا 4.5 ppb است.
7.2 تعیین کمی
مقادیر میانگین مقادیر جذب معادل درصد میانگین مقدار OD (B) نمونه و محلول استاندارد تقسیم بر مقدار OD (B0) اولین محلول استاندارد (0 استاندارد) و متعاقباً در 100٪ ضرب می شود. ، به این معنا که،
| درصد مقدار جذب = | ب | × 100% |
| B0 |
B-میانگین (چاهک دوگانه) مقدار OD نمونه یا محلول استاندارد
B0 - مقدار متوسط OD محلول استاندارد 0ng/mL
منحنی استاندارد را با درصد جذب محلول های استاندارد و مقادیر نیم لگاریتمی محلول های استاندارد MQCA (ng/mL) به ترتیب به عنوان محور Y و X رسم کنید.غلظت متناظر نمونه را از منحنی استاندارد با وارد کردن درصد جذب آن در منحنی استاندارد بخوانید.مقدار حاصل متعاقباً در برابر رقت مربوطه ضرب می شود، بنابراین در نهایت غلظت MQCA در نمونه بدست می آید.
استفاده از نرم افزار آنالیز حرفه ای این کیت برای آنالیز دقیق و سریع تعداد زیادی از نمونه ها راحت تر خواهد بود.(لطفا برای دریافت این نرم افزار با ما تماس بگیرید)
8. اقدامات احتیاطی
1. دمای اتاق زیر 25 ℃ یا دمای معرف ها و بازگرداندن نمونه ها به دمای اتاق (20-25 ℃) منجر به کاهش استاندارد OD می شود.
2. خشک شدن میکروپلیت در فرآیند شستشو با شرایطی از جمله منحنی های استاندارد غیر خطی و تکرارپذیری نامطلوب همراه خواهد بود.
3. هر معرف و مخلوط واکنش را به طور یکنواخت مخلوط کنید و میکروپلیت را به طور کامل بشویید، در غیر این صورت تکرارپذیری نامطلوب وجود خواهد داشت.
4. محلول توقف محلول اسید سولفوریک 2 مولار است، از تماس با پوست خودداری کنید.
5. میکروپلیت استفاده نشده را در یک کیسه آب بندی خودکار قرار دهید تا دوباره آب بندی شود.ماده استاندارد و رنگ بی رنگ حساس به نور است و بنابراین نمی توان آنها را مستقیماً در معرض نور قرار داد
6. از کیت بیش از تاریخ انقضای آن استفاده نکنید.استفاده از معرف های رقیق شده یا تقلبی از کیت ها منجر به تغییر در حساسیت و تشخیص مقادیر OD می شود.معرف ها را از کیت های شماره های مختلف برای استفاده تعویض نکنید
7. محلول رنگی را با هر رنگی که نشان دهنده انحطاط این محلول است دور بریزید.مقدار تشخیص محلول استاندارد 0 کمتر از 0.5 نشان دهنده انحطاط آن است
8. دمای واکنش بهینه 25 ℃ است و دمای خیلی بالا یا خیلی پایین باعث تغییر در حساسیت تشخیص و مقادیر OD می شود.
9. تاریخ نگهداری و انقضا
ذخیره سازی: در دمای 2 تا 8 ℃، یخ زده نگهداری شود.
تاریخ انقضا: 12 ماه;تاریخ تولید روی جعبه درج شده است.
توجه: اگر بسته خلاء میکروپلیت نشتی داشته باشد، استفاده از آن همچنان معتبر است، در نتیجه آزمایش تأثیری نداشته باشید، برای استفاده راحت باشید.
Q1: چه زمانی ارسال می شود؟
A1: ما کالا را در اسرع وقت ظرف 7 روز کاری پس از دریافت پرداخت برای شما ارسال می کنیم.(در صورت وجود عوامل خارجی مانند اپیدمی، ممکن است زایمان به تاخیر بیفتد)
Q2: آیا از OEM/ODM پشتیبانی می کند؟
A2: می توان آن را پشتیبانی کرد، اما مقدار خاص باید بیش از 100000 قطعه باشد، که برای محصولات سفارشی مناسب است.
Q3: کارخانه شما از نظر کنترل کیفیت چگونه است؟
A3: ما گواهینامه ملی ISO9001 و ISO13485 را داریم.فرآیند تولید ما مطابق با روش های استاندارد برای اطمینان از کیفیت مطلوب محصول است.
Q4: چگونه خدمات پس از فروش ارائه کنیم؟
A4: ما خدمات پس از فروش فنی آنلاین حرفه ای را ارائه می دهیم.ما می توانیم از طریق ویدئو، تلفن و غیره به شما راهنمایی های تک به تک ارائه دهیم.
Q5: روش پرداخت چیست؟
A5: ما پرداخت را توسط T/T دریافت می کنیم.
Q6: چگونه حمل کنیم؟
A6: بهترین روش حمل و نقل را با دریافت قیمت از بسیاری از شرکت های حمل و نقل تعاونی ما انتخاب کنید و همچنین با توجه به نیاز خود ارسال کنید.