به بهبود ادامه دهید
| محل منبع: | چین |
|---|---|
| نام تجاری: | Green Spring |
| گواهی: | ISO13485,ISO9001 |
| شماره مدل: | LSY-10040 |
| مقدار حداقل تعداد سفارش: | 1 کیت |
| قیمت: | negotiable |
| زمان تحویل: | 7 تا 14 روز |
| شرایط پرداخت: | T/T |
| قابلیت ارائه: | 100000 تست در روز |
| عملکرد نمونه: | برای شیر، تخم مرغ، ادرار، سرم. خوراک، مرغ، گوشت خوک، اردک | حساسیت (ppb): | 0.1ppb |
|---|---|---|---|
| مشخصات: | 96 چاه / کیت | کلید واژه ها: | کیت تست فنیل اتانول آمین A ELISA |
| تایپ کنید: | کیت تشخیصی الایزا | ذخیره سازی: | در دمای 2-8 ℃، یخ زده نگهداری کنید. |
| برجسته کردن: | کیت تست فنیل اتانول آمین,کیت تست الایزا,تخم مرغ شیر |
||
کیت تست فنیل اتانول آمین A ELISA برای سرم ادرار تخم مرغ شیر 96 Wells/Kit
1. اصل
کیت تست بر اساس آنزیم ایمونواسی رقابتی برای تشخیص فنیل اتانول آمین A در نمونه است.آنتی ژن کونژوگه از قبل روی نوارهای میکرو چاه پوشیده شده است.فنیل اتانول آمین A در نمونه و آنتی ژن های جفت کننده که از قبل روی نوارهای ریز چاه پوشانده شده اند برای آنتی بادی های ضد فنیل اتانول آمین A رقابت می کنند.پس از افزودن آنزیم مزدوج، بستر TMB برای رنگ‌آمیزی اضافه می‌شود.مقدار چگالی نوری (OD) نمونه با غلظت فنیل اتانول آمین A در نمونه همبستگی منفی دارد.مقدار با منحنی استاندارد مقایسه می شود و غلظت فنیل اتانول آمین A متعاقباً به دست می آید.
2. مشخصات فنی
حساسیت: 0.1ppb
دمای دستگاه جوجه کشی: 25 درجه سانتیگراد
زمان دستگاه جوجه کشی: 30 دقیقه تا 15 دقیقه
حد تشخیص
بافت 0.2 ppb
خوراک 0.5ppb
واکنش های متقاطع:
فنیل اتانول آمین A 100%
راکتوپامین <1٪
سالبوتامول <1٪
کلنبوترول <1٪
نرخ بازیابی
بافت، خوراک 25±85٪
3. اجزاء
| 1 | نوارهای میکرو چاه |
12 نوار با 8 نوار قابل جدا شدن چاه هر کدام |
|
| 2 | محلول استاندارد 6× (هر کدام 1 میلی لیتر) | 0ppb | 0.1ppb |
| 0.3ppb | 0.9ppb | ||
| 2.7ppb | 8.1ppb | ||
| 3 | مزدوج آنزیمی | 7 میلی لیتر | کلاه قرمز |
| 4 | محلول کار آنتی بادی | 7 میلی لیتر | کلاه آبی |
| 5 | بستر A | 7 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 6 | بستر B | 7 میلی لیتر | کلاه سیاه |
| 7 | راه حل را متوقف کنید | 7 میلی لیتر | کلاه زرد |
| 8 | بافر شستشوی غلیظ 20× | 40 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 9 | 2× محلول حل مجدد غلیظ | 50 میلی لیتر | کلاه شفاف |
4. مواد مورد نیاز اما ارائه نشده است
1) تجهیزات: میکروپلیت خوان، چاپگر، هموژنایزر، دستگاه خشک کن نیتروژن، نوسان ساز، سانتریفیوژ، پیپت های اندازه گیری، تعادل (حساسیت متقابل 0.01 گرم)، انکوباتور.
2) میکروپیپتورها: تک کانال 20-200 میکرولیتر و 100-1000 میکرولیتر و چند کانال 30-300 میکرولیتر.
3) معرفها: اتیل استات، N-هگزان، اسید استیک یخبندان
5. نمونه قبل از درمان
دستورالعمل (قبل از درمان باید به نکات زیر توجه شود)
1) فقط نوک های یکبار مصرف را می توان برای آزمایش ها استفاده کرد و هنگام استفاده برای جذب معرف های مختلف، نوک ها باید تغییر کنند.
2) قبل از انجام آزمایش، هر ظروف آزمایشی باید تمیز باشد و در صورت لزوم مجدداً تمیز شود تا از آلودگی هایی که با نتایج آزمایش تداخل می کند جلوگیری شود.
آماده سازی محلول قبل از پیش تیمار نمونه:
1) محلول استخراج نمونه: 99 میلی لیتر اتیل استات را بردارید، 1 میلی لیتر اسید استیک گلاسیال به آن اضافه کنید و خوب مخلوط کنید.
2) محلول حل مجدد نمونه: محلول حل مجدد 2× غلیظ با آب دیونیزه به نسبت 1:1 رقیق می شود (1 میلی لیتر محلول حل مجدد غلیظ + 1 میلی لیتر آب دیونیزه) که برای حل مجدد نمونه استفاده می شود.
آماده سازی نمونه ها
5.1 خوراک
1. نمونه را آسیاب کنید، 0.05±1.0 گرم را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتری قرار دهید.
2. 10 میلی لیتر محلول استخراج نمونه اضافه کنید، با اسیلاتور به مدت 3 دقیقه تکان دهید.
3. با سرعت 4000 r/min در دمای اتاق به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید.
4. 2 میلی لیتر مایع رویی بگیرید، با باد با نیتروژن یا هوا در دمای 50-60 درجه سانتیگراد خشک کنید.
5. 1 میلی لیتر N-هگزان اضافه کنید، سپس 1 میلی لیتر محلول حل مجدد نمونه اضافه کنید، به مدت 30 ثانیه تکان دهید.
6. با سرعت 4000 r/min در دمای اتاق به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید، فاز آلی لایه بالا را بردارید.
7. 20 میکرولیتر لایه پایینی را برای تجزیه و تحلیل بردارید.
برابر رقت نمونه: 5
(به دلیل وجود اختلال در نمونه، 2PPB را به عنوان مقدار CUT OFF نمونه توصیه کنید.)
5.2 بافت
1. نمونه بافت همگن 0.05±2.0 گرم را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتری بگیرید.
2. 8 میلی لیتر محلول استخراج نمونه را اضافه کنید، با اسیلاتور به مدت 2 دقیقه تکان دهید.
3. سانتریفیوژ با سرعت 4000 دور در دقیقه در دمای اتاق به مدت 10 دقیقه.
4. 2 میلی لیتر مایع رویی را بگیرید، با نیتروژن یا هوا در دمای 50-60 درجه سانتیگراد خشک کنید.
5. 1 میلی لیتر N-هگزان اضافه کنید، سپس 1 میلی لیتر محلول حل مجدد نمونه اضافه کنید، به مدت 30 ثانیه تکان دهید.
6. با سرعت 4000 r/min در دمای اتاق به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید، فاز آلی لایه بالا را بردارید.
7. 20 میکرولیتر لایه پایینی را برای تجزیه و تحلیل بگیرید.
برابر رقت نمونه: 2
(به دلیل وجود اختلال در نمونه، 1PPB را به عنوان مقدار CUT OFF نمونه توصیه کنید.)
6. روش های الایزا
6.1 دستورالعمل
1. قبل از استفاده، تمام معرف ها و نوارهای ریز چاهک را به دمای اتاق (20 تا 25 درجه سانتیگراد) برسانید.
2. تمام معرف ها را بلافاصله پس از استفاده به 2-8 ℃ برگردانید.
3. تکرارپذیری آنالیز ELISA تا حد زیادی به قوام شستشوی صفحه بستگی دارد.عملکرد صحیح شستشوی صفحه از نکات کلیدی در روش های الایزا است.
4. برای انکوباسیون در دمای ثابت، تمام نمونه ها و معرف ها باید از قرار گرفتن در معرض نور اجتناب کنند و هر میکروپلیت باید توسط غشای پوششی مهر و موم شود.
6.2 رویه های عملیاتی
1. کیت تست را برای حداقل 30 دقیقه به دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) برسانید، توجه داشته باشید که هر معرف مایع باید قبل از استفاده تکان داده شود تا به طور یکنواخت مخلوط شود.
2. آماده سازی محلول: 40 میلی لیتر بافر شستشوی غلیظ 20× را با آب دیونیزه در 1:19 (1 قسمت 20× بافر غلیظ شستشو + 19 قسمت آب دیونیزه) رقیق کنید یا به مقدار مورد نیاز آماده کنید.
3. نوارهای ریز چاهک مورد نیاز را در قاب های صفحه قرار دهید.میکروپلیت استفاده نشده را مجدداً مهر و موم کنید، در دمای 2-8 ℃ نگهداری شود، یخ زده نباشد.
4. شماره گذاری: ریز چاه ها را با توجه به نمونه ها و محلول استاندارد شماره گذاری کنید.هر نمونه و محلول استاندارد باید در دو نسخه انجام شود.موقعیت های خود را ثبت کنند.
5. 50 میکرولیتر از نمونه یا محلول استاندارد را به چاهک های تکراری جداگانه اضافه کنید.50 میکرولیتر آنزیم مزدوج اضافه کنید، سپس 50 میکرولیتر از محلول عامل آنتی بادی را به هر چاهک اضافه کنید، میکروپلیت را با غشای پوششی ببندید و در دمای 25 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه انکوبه کنید.
6. مایع را از ریز چاه بریزید، روی کاغذ جاذب خشک کنید.250 میکرولیتر در چاه آب دیونیزه شده اضافه کنید، به مدت 15 تا 30 ثانیه بشویید، سپس خارج کرده و با کاغذ جاذب بپوشانید تا خشک شود، 4 تا 5 بار تکرار کنید.
7. رنگ آمیزی: 50 میکرولیتر از محلول بستر A، 50 میکرولیتر از محلول B را به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن دستی بشقاب را به آرامی مخلوط کرده و در دمای 25 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه در تاریکی انکوبه کنید تا رنگ شود.
8. تعیین: 50 میکرولیتر از محلول توقف را به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن دستی صفحه را به آرامی مخلوط کنید.برای تعیین مقدار OD هر چاهک، طول موج میکروپلیت خوان را روی 450 نانومتر تنظیم کنید.(توصیه می شود مقدار OD را در طول موج دوگانه 450/630 نانومتر در عرض 5 دقیقه بخوانید).
7. قضاوت نتیجه
دو روش برای قضاوت در مورد نتایج وجود دارد.اولی قضاوت تقریبی است، در حالی که دومی تعیین کمی است.توجه داشته باشید که مقدار OD نمونه با فنیل اتانول آمین A در نمونه همبستگی منفی دارد.
7.1 تعیین کیفی
محدوده غلظت (ng/mL) را می توان از مقایسه میانگین مقدار OD نمونه با محلول استاندارد بدست آورد.با فرض اینکه مقدار OD نمونهⅠ 0.3 و مقدار نمونهⅡ 1.0 باشد، مقدار OD محلول های استاندارد است: 2.243 برای 0ppb، 1.866 برای 0.1ppb، 1.415 برای 0.3ppb، 0.864 برای 0.94ppb، 0.864 برای 0.94ppb، 0.864 برای 0.94ppb. 0.155 برای 8.1ppb، بر این اساس محدوده غلظت نمونه Ⅰ 0.3 تا 0.9ppb است و نمونه Ⅱ 2.7ppb تا 8.1ppb است.
7.2 تعیین کمی
مقادیر متوسط مقادیر جذب بدست آمده برای مقدار متوسط OD (B) نمونه و محلول استاندارد تقسیم بر مقدار OD (B0) اولین محلول استاندارد (0 استاندارد) و متعاقباً در 100٪ ضرب می شود.
| درصد مقدار جذب = | ب | × 100% |
| B0 |
ب - مقدار متوسط OD نمونه یا محلول استاندارد
B0 - مقدار متوسط OD محلول استاندارد 0ng/mL
منحنی استاندارد را با درصد جذب محلول های استاندارد و مقادیر نیم لگاریتمی محلول های استاندارد فنیل اتانول آمین A (ng/mL) به ترتیب به عنوان محور Y و X رسم کنید.غلظت متناظر نمونه را از منحنی استاندارد با وارد کردن درصد جذب آن در منحنی استاندارد بخوانید.مقدار به دست آمده متعاقبا در برابر رقت مربوطه ضرب می شود و در نهایت غلظت واقعی فنیل اتانول آمین A در نمونه بدست می آید.
استفاده از نرم افزار آنالیز حرفه ای این کیت برای آنالیز دقیق و سریع تعداد زیادی از نمونه ها راحت تر خواهد بود.(لطفا برای دریافت این نرم افزار با ما تماس بگیرید)
8. اقدامات احتیاطی
1. دمای اتاق زیر 25 ℃ یا دمای معرف ها و بازگرداندن نمونه ها به دمای اتاق (20-25 ℃) منجر به کاهش استاندارد OD می شود.
2. خشکی میکروپلیت در فرآیند شستشو با شرایطی از جمله منحنی های استاندارد غیر خطی و تکرارپذیری نامطلوب همراه خواهد بود.بنابراین بلافاصله پس از شستشو به مرحله بعدی ادامه دهید.
3. به طور یکنواخت مخلوط کنید، بشقاب را کاملاً بشویید، تکرارپذیری آنالیز ELISA تا حد زیادی به قوام شستشوی صفحه بستگی دارد.
4. محلول توقف محلول اسید سولفوریک 2 مولار است، از تماس با پوست خودداری کنید.
5. از کیت بیش از تاریخ انقضای آن استفاده نکنید.استفاده از معرف های رقیق شده یا تقلبی از کیت ها منجر به تغییر در حساسیت و تشخیص مقادیر OD می شود.معرف ها را از کیت های شماره های مختلف برای استفاده تعویض نکنید.
6. میکروپلیت استفاده نشده را در یک کیسه آب بندی خودکار قرار دهید تا دوباره آب بندی شود.ماده استاندارد و رنگ بی رنگ حساس به نور است و بنابراین نمی توان آنها را مستقیماً در معرض نور قرار داد.
7. محلول رنگی را با هر رنگی که نشان دهنده انحطاط این محلول است دور بریزید.مقدار تشخیص سولوتین استاندارد 0 کمتر از 0.5 (A450 nm<0.5) نشان دهنده انحطاط آن است.
8. دمای واکنش بهینه 25 ℃ است، و دمای بیش از حد بالا یا پایین منجر به تغییرات در حساسیت تشخیص و مقادیر OD می شود.
9. تاریخ نگهداری و انقضا
ذخیره سازی: در دمای 2 تا 8 ℃، یخ زده نگهداری شود.
تاریخ انقضا: 12 ماه;تاریخ تولید روی جعبه درج شده است
توجه: اگر بسته خلاء میکروپلیت نشتی داشته باشد، استفاده از آن همچنان معتبر است، در نتیجه آزمایش تأثیری نداشته باشید، برای استفاده راحت باشید.
Q1: چه زمانی ارسال می شود؟
A1: ما کالا را در اسرع وقت ظرف 7 روز کاری پس از دریافت پرداخت برای شما ارسال می کنیم.(در صورت وجود عوامل خارجی مانند اپیدمی، ممکن است زایمان به تاخیر بیفتد)
Q2: آیا از OEM/ODM پشتیبانی می کند؟
A2: می توان آن را پشتیبانی کرد، اما مقدار خاص باید بیش از 100000 قطعه باشد، که برای محصولات سفارشی مناسب است.
Q3: کارخانه شما از نظر کنترل کیفیت چگونه است؟
A3: ما گواهینامه ملی ISO9001 و ISO13485 را داریم.فرآیند تولید ما مطابق با روش های استاندارد برای اطمینان از کیفیت مطلوب محصول است.
Q4: چگونه خدمات پس از فروش را ارائه دهیم؟
A4: ما خدمات پس از فروش فنی آنلاین حرفه ای را ارائه می دهیم.ما می توانیم از طریق ویدئو، تلفن و غیره به شما راهنمایی های تک به تک ارائه دهیم.
Q5: روش پرداخت چیست؟
A5: ما پرداخت را توسط T/T دریافت می کنیم.
Q6: چگونه حمل کنیم؟
A6: بهترین روش حمل و نقل را با دریافت قیمت از بسیاری از شرکت های حمل و نقل تعاونی ما انتخاب کنید و همچنین مطابق با نیاز خود ارسال کنید.