به بهبود ادامه دهید
| محل منبع: | چین |
|---|---|
| نام تجاری: | Green Spring |
| گواهی: | ISO13485,ISO9001 |
| شماره مدل: | LSY-10048 |
| مقدار حداقل تعداد سفارش: | 1 کیت |
| قیمت: | negotiable |
| زمان تحویل: | 7 تا 14 روز |
| شرایط پرداخت: | T/T |
| قابلیت ارائه: | 100000 تست در روز |
| عملکرد نمونه: | عسل | حساسیت (ppb): | 0.05ppb |
|---|---|---|---|
| مشخصات: | 96 چاه / کیت | کلید واژه ها: | کیت تست ELISA مترونیدازول |
| تایپ کنید: | کیت تشخیصی الایزا | ذخیره سازی: | در دمای 2-8 ℃، یخ زده نگهداری کنید. |
| برجسته کردن: | کیت تشخیص سریع آنتی بادی عسل,کیت تشخیص سریع آنتی بادی Wells/Kit,کیت تشخیص سریع آنتی بادی 96 |
||
کیت تست ELISA مترونیدازول برای عسل 96 چاهک/حساسیت کیت 0.05 ppb
1. اصل
این کیت تست بر اساس آنزیم ایمونواسی رقابتی برای تشخیص مترونیدازول در نمونه است.آنتی ژن های جفت کننده از قبل روی نوارهای ریز چاه پوشیده شده اند.مترونیدازول در نمونه و آنتی ژن های جفت کننده که از قبل روی نوارهای ریز چاه پوشانده شده اند برای آنتی بادی های ضد مترونیدازول رقابت می کنند.پس از افزودن آنزیم مزدوج، بستر TMB برای رنگ‌آمیزی اضافه می‌شود.مقدار چگالی نوری (OD) نمونه با مترونیدازول موجود در آن همبستگی منفی دارد.این مقدار با منحنی استاندارد مقایسه شده و غلظت مترونیدازول متعاقباً بدست می آید.
2. مشخصات فنی
حساسیت: 0.05ppb
حد تشخیص
عسل: حدود 0.1ppb
توجه: ppb=ng/ml یا ng/g
نرخ واکنش متقاطع:
مترونیدازول 100%
اورنیدازول 83 درصد
سکنیدازول 110%
مترونیدازول-OH <1٪
تینیدازول <1٪
دی متریدازول <1٪
میزان بازیابی: 90±30٪
3. اجزاء
| 1 | نوارهای میکرو چاه |
12 نوار با 8 نوار قابل جدا شدن چاه هر کدام |
|
| 2 | محلول استاندارد 6× (هر کدام 1 میلی لیتر) | 0ppb | 0.05 ppb |
| 0.15ppb | 0.45ppb | ||
| 1.35ppb | 4.05 ppb | ||
| 3 | مزدوج آنزیمی | 12 میلی لیتر | کلاه قرمز |
| 4 | محلول کار آنتی بادی | 7 میلی لیتر | کلاه آبی |
| 5 | بستر A | 7 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 6 | بستر B | 7 میلی لیتر | کلاه سیاه |
| 7 | راه حل را متوقف کنید | 7 میلی لیتر | کلاه زرد |
| 8 | بافر شستشوی غلیظ 20× | 30 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 9 | محلول حل مجدد | 50 میلی لیتر | کلاه شفاف |
4. مواد مورد نیاز اما ارائه نشده است
1) تجهیزات: میکروپلیت خوان (450 نانومتر، 630 نانومتر)، چاپگر، دستگاه خشک کن نیتروژن، گرداب، شیکر، سانتریفیوژ (3000 گرم و بالاتر)، پیپت های اندازه گیری، تعادل (حساسیت متقابل 0.01 گرم)، انکوباتور (4℃،25) ) حمام آب، تایمر؛
2) میکروپیپتورها: تک کانال 20-200 میکرولیتر، 100-1000 میکرولیتر و هشت کانال 30-300 میکرولیتر.
3) معرف ها (AR): Na2HPO4▪12H2O، NaH2PO4·2H2O، اتیل استات، هگزان، آب دیونیزه.
5. نمونه قبل از درمان
دستورالعمل ها
نکات زیر باید قبل از انجام پیش درمان هر نوع نمونه رعایت شود:
1) فقط نوک های یکبار مصرف را می توان برای آزمایش ها استفاده کرد و هنگام استفاده برای جذب معرف های مختلف، نوک ها باید تغییر کنند.
2) قبل از انجام آزمایش، هر یک از تجهیزات آزمایشی باید تمیز باشد و در صورت لزوم باید مجدداً تمیز شوند تا از آلودگی هایی که با نتایج آزمایش تداخل می کند جلوگیری شود.
آماده سازی محلول قبل از پیش تیمار نمونه:
1) بافر شستشو: 1 قسمت 20× بافر غلیظ شستشو + 19 قسمت آب دیونیزه.
2) بافر فسفات 0.2 مولار: 25.8 گرم Na2HPO4▪12H2O، 4.350 گرم NaH2PO4·2H2O وزن کنید، 500 میلی لیتر آب یونیزه شده اضافه کنید تا کاملا حل شود.
5.1 آماده سازی نمونه
عسل
1) نمونه عسل 2.0±0.05 گرم را در لوله سانتریفیوژ پلاستیکی 50 میلی لیتر وزن کنید.
2) 2 میلی لیتر بافر فسفات 0.2 مولار اضافه کنید، سپس 8 میلی لیتر اتیل استات را اضافه کنید، به مدت 5 دقیقه به شدت تکان دهید (یا از گرداب به مدت 3 دقیقه استفاده کنید) تا نمونه به طور کامل با فاز آلی تماس پیدا کند.
3) در دمای بالای 3000 گرم در دمای اتاق به مدت 5 دقیقه سانتریفیوژ کنید.
4) 4 میلی لیتر مایع شفاف لایه بالا را به لوله سانتریفیوژ 5 میلی لیتری منتقل کنید (توجه داشته باشید: فاز آب لایه پایین را نگیرید)، ضربه بزنید تا در حمام آب 50-60 درجه سانتیگراد خشک شود.
5) 1 میلی لیتر هگزان و 0.5 میلی لیتر محلول حل کننده را بر این اساس اضافه کنید، به مدت 2 دقیقه به شدت تکان دهید (یا از ورتکس به مدت 1 دقیقه استفاده کنید).
6) در دمای بالای 3000 گرم در دمای اتاق به مدت 5 دقیقه سانتریفیوژ کنید.
7) فاز آلی لایه بالا را دور بریزید، 50 لیتر مایع لایه پایین را برای آزمایش بردارید.
برابر رقت نمونه: 0.5
6. روش های الایزا
6.1 دستورالعمل
1) قبل از استفاده همه معرف ها و نوارهای ریز چاه را به دمای اتاق (20-25 ℃) برسانید.
2) بلافاصله پس از استفاده تمام معرف ها را به 2-8 ℃ برگردانید.
3) تکرارپذیری آنالیز ELISA تا حد زیادی به قوام شستشوی صفحه بستگی دارد.عملکرد صحیح شستشوی صفحه نکته کلیدی در روش های الایزا است.
4) برای انکوباسیون در دمای ثابت، تمام نمونه ها و معرف ها باید از قرار گرفتن در معرض نور اجتناب کنند و هر میکروپلیت باید توسط غشای پوششی مهر و موم شود.
6.2 رویه های عملیاتی
1. کیت تست را حداقل به مدت 30 دقیقه به دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) برسانید، توجه داشته باشید که هر معرف باید قبل از استفاده تکان داده شود تا به طور یکنواخت مخلوط شود، نوارهای میکرو چاه مورد نیاز را در قاب های صفحه قرار دهید.میکروپلیت استفاده نشده را دوباره مهر و موم کنید، در دمای 2-8 ℃ نگهداری کنید، یخ زده نشوید.
2. شماره گذاری: ریز چاه ها را با توجه به نمونه ها و محلول استاندارد شماره گذاری کنید.هر نمونه و محلول استاندارد باید در دو نسخه انجام شود، موقعیت آنها را ثبت کنید.
3. 50 میکرولیتر از نمونه یا محلول استاندارد را به چاهک های تکراری جداگانه اضافه کنید.سپس 50 میکرولیتر از محلول عامل آنتی بادی را به هر چاهک اضافه کنید، با تکان دادن دستی صفحه را به آرامی مخلوط کنید.میکروپلیت را با غشای پوششی ببندید و در دمای 4 درجه سانتیگراد به مدت 60 دقیقه در تاریکی انکوبه کنید.
4. مایع را از میکرووله بریزید، 250 میکرولیتر در چاه بافر شستشو را به میکروپلیت بشویید به مدت 15 تا 30 ثانیه، سپس بافر شستشو را از میکرووله بریزید، بافر شستشو را اضافه کنید تا 3 تا 4 بار شستشو دهید، سپس خارج کنید. و با کاغذ جاذب صاف کنید تا خشک شود.
5. 100 ul conjugate آنزیمی را اضافه کنید (بعد از مرحله شستشو، میکروپلیت را برای مدت طولانی در دمای اتاق قرار ندهید تا از خشک شدن سرب میکروپلیت و اختلاف نتیجه جلوگیری شود)، به آرامی با تکان دادن صفحه به صورت دستی مخلوط کنید.میکروپلیت را با غشای پوششی ببندید و در دمای 25 درجه سانتیگراد به مدت 20 دقیقه در تاریکی انکوبه کنید.شستشو به عنوان مرحله 4.
6. رنگ آمیزی: 100 لیتر مخلوط از محلول بستر A و محلول بستر B را به هر چاهک اضافه کنید (توجه: محلول بستر A و محلول بستر B را به نسبت 1:1 مخلوط کنید، مخلوط را در 10 دقیقه استفاده کنید، از فلز برای نگهداری یا هم زدن استفاده نکنید. اجتناب از بستر نامعتبر).با تکان دادن دستی صفحه را به آرامی مخلوط کنید، میکروپلیت را با غشای پوششی ببندید و سپس در دمای 25 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه در تاریکی برای رنگ آمیزی انکوبه کنید.
7. تعیین: 50 میکرولیتر از محلول توقف را به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن دستی صفحه را به آرامی مخلوط کنید.هنگامی که بستر از آبی به زرد رنگ می شود، با موفقیت متوقف شود.توصیه می شود مقدار OD را در طول موج دوگانه 450/630 نانومتر در عرض 5 دقیقه بخوانید.
7. قضاوت نتیجه
دو روش برای قضاوت در مورد نتایج وجود دارد: اولی قضاوت تقریبی و دومی تعیین کمی است.توجه داشته باشید که مقدار OD نمونه با غلظت مترونیدازول همبستگی منفی دارد.
7.1 تعیین کیفی
محدوده غلظت (ng/mL) مترونیدازول را می توان از مقایسه میانگین مقدار OD نمونه با محلول استاندارد بدست آورد.با فرض اینکه مقدار OD نمونهⅠ 0.3 و مقدار نمونهⅡ 1.0 باشد، مقدار OD محلول های استاندارد است: 2.243 برای 0ppb، 1.816 برای 0.05ppb، 1.415 برای 0.15ppb، 0.74 برای ppb3، 0.35 برای 0.45ppb. 0.155 برای 4.05ppb، بر این اساس محدوده غلظت نمونه Ⅰ 1.35 تا 4.05ppb است و نمونه Ⅱ 0.05 تا 0.45ppb است.
7.2 تعیین کمی
مقادیر متوسط مقادیر جذب برای میانگین مقدار OD (B) نمونه و محلول استاندارد تقسیم بر مقدار OD (B0) اولین محلول استاندارد (0 استاندارد) بدست می آید و متعاقباً در 100٪ ضرب می شود. ،
| درصد مقدار جذب = | ب | × 100% |
| B0 |
ب - مقدار متوسط OD نمونه یا محلول استاندارد
B0 - مقدار متوسط OD محلول استاندارد 0ng/mL
منحنی استاندارد را با درصد جذب محلول استاندارد و مقادیر نیم لگاریتمی محلول استاندارد مترونیدازول (ng/mL) به ترتیب به عنوان محور Y و X رسم کنید.غلظت متناظر نمونه را از منحنی استاندارد با وارد کردن درصد جذب آن در منحنی استاندارد بخوانید.مقدار به دست آمده متعاقبا در برابر رقت مربوطه ضرب می شود و در نهایت غلظت مترونیدازول در نمونه بدست می آید.
استفاده از نرم افزار آنالیز حرفه ای این کیت برای آنالیز دقیق و سریع تعداد زیادی از نمونه ها راحت تر خواهد بود.(لطفا برای دریافت این نرم افزار با ما تماس بگیرید).
8. اقدامات احتیاطی
1. دمای اتاق زیر 25 ℃ یا دمای معرف ها و بازگرداندن نمونه ها به دمای اتاق (20-25 ℃) منجر به کاهش استاندارد OD می شود.
2. خشکی میکروپلیت در فرآیند شستشو با شرایطی از جمله منحنی های استاندارد غیر خطی و تکرارپذیری نامطلوب همراه خواهد بود.بنابراین بلافاصله پس از شستشو به مرحله بعدی ادامه دهید.
3. به طور مساوی مخلوط کنید، در غیر این صورت تکرارپذیری نامطلوب وجود خواهد داشت.
4. محلول توقف محلول اسید سولفوریک 2 مولار است، از تماس با پوست خودداری کنید.
5. از کیت بیش از تاریخ انقضای آن استفاده نکنید.استفاده از معرف های رقیق شده یا تقلبی از کیت ها منجر به تغییر در حساسیت و تشخیص مقادیر OD می شود.معرف ها را از کیت های لات های مختلف برای استفاده تعویض نکنید.
6. میکروپلیت استفاده نشده را در یک کیسه آب بندی خودکار قرار دهید تا دوباره آب بندی شود.محلول استاندارد و رنگ ساز بی رنگ حساس به نور است و بنابراین نمی توان آنها را مستقیماً در معرض نور قرار داد.
7. محلول رنگی را با هر رنگی که نشان دهنده انحطاط این محلول است دور بریزید.مقدار تشخیص محلول استاندارد 1 (0 ppb) کمتر از 0.5 نشان دهنده انحطاط آن است.
9. تاریخ نگهداری و انقضا
ذخیره سازی: در دمای 2 تا 8 ℃، یخ زده نگهداری شود.
تاریخ انقضا: 12 ماه;تاریخ تولید روی جعبه درج شده است
Q1: چه زمانی ارسال می شود؟
A1: ما کالا را در اسرع وقت ظرف 7 روز کاری پس از دریافت پرداخت برای شما ارسال می کنیم.(در صورت وجود عوامل خارجی مانند اپیدمی، ممکن است زایمان به تاخیر بیفتد)
Q2: آیا از OEM/ODM پشتیبانی می کند؟
A2: می توان آن را پشتیبانی کرد، اما مقدار خاص باید بیش از 100000 قطعه باشد، که برای محصولات سفارشی مناسب است.
Q3: کارخانه شما از نظر کنترل کیفیت چگونه است؟
A3: ما گواهینامه ملی ISO9001 و ISO13485 را داریم.فرآیند تولید ما مطابق با روش های استاندارد برای اطمینان از کیفیت مطلوب محصول است.
Q4: چگونه خدمات پس از فروش را ارائه دهیم؟
A4: ما خدمات پس از فروش فنی آنلاین حرفه ای را ارائه می دهیم.ما می توانیم از طریق ویدئو، تلفن و غیره به شما راهنمایی های تک به تک ارائه دهیم.
Q5: روش پرداخت چیست؟
A5: ما پرداخت را توسط T/T دریافت می کنیم.
Q6: چگونه حمل کنیم؟
A6: بهترین روش حمل و نقل را با دریافت قیمت از بسیاری از شرکت های حمل و نقل تعاونی ما انتخاب کنید و همچنین مطابق با نیاز خود ارسال کنید.