به بهبود ادامه دهید
| محل منبع: | چین |
|---|---|
| نام تجاری: | Green Spring |
| گواهی: | ISO13485,ISO9001 |
| شماره مدل: | LSY-10036 |
| مقدار حداقل تعداد سفارش: | 1 کیت |
| قیمت: | negotiable |
| زمان تحویل: | 7 تا 14 روز |
| شرایط پرداخت: | T/T |
| قابلیت ارائه: | 100000 تست در روز |
| عملکرد نمونه: | برای شیر، تخم مرغ، ادرار، سرم. مرغ، گوشت خوک، اردک | حساسیت (ppb): | 0.1ppb |
|---|---|---|---|
| مشخصات: | 96 چاه / کیت | کلید واژه ها: | کیت الایزا آگونیست بتا |
| تایپ کنید: | کیت تشخیصی الایزا | ذخیره سازی: | در دمای 2-8 ℃، یخ زده نگهداری کنید. |
| برجسته کردن: | کیت آزمایش سرم ادرار بتا آگونیست,آزمایش سرم ادرار 0.1 ppb,تست الایزای مرغ گوشت خوک برای کمک ها |
||
کیت الایزا بتا آگونیست برای سرم ادرار تخم مرغ شیر مرغ 96 چاه/کیت
1. اصل
کیت آزمایش بتا آگونیست بر اساس آنزیم ایمونواسی رقابتی برای تشخیص β آگونیست ها در نمونه است.آنتی ژن جفت کننده از قبل روی نوارهای ریز چاه پوشیده شده است.β آگونیست‌های موجود در نمونه و آنتی‌ژن‌های جفت‌کننده از پیش پوشش داده‌شده بر روی نوارهای چاهک برای آنتی‌بادی‌های ضد β آگونیست رقابت می‌کنند.پس از افزودن آنزیم مزدوج، بستر TMB برای رنگ‌آمیزی اضافه می‌شود.مقدار چگالی نوری (OD) نمونه با آگونیست های β در نمونه همبستگی منفی دارد.این مقدار با منحنی استاندارد مقایسه می شود و پس از آن بقایای آگونیست های β به دست می آید.
2. مشخصات فنی
حساسیت: 0.1ppb
دمای جوجه کشی: 25 ℃
زمان جوجه کشی: 30 دقیقه تا 15 دقیقه
حد تشخیص:
ادرار خوک 0.3ppb
گوشت خوک 0.6ppb
میزان واکنش متقاطع: کلنبوترول 100٪، سیماترول <4٪، برمبوترول 60٪، مابوترول 108٪، بامبوترول <5٪، کلرپرنالین <1٪، سالبوتامول 75٪، تربوتالین 25٪، پنبوتولول 19٪، تولوبوترول 23٪، فنوترول < 0.1٪، راکتوپامین <0.1٪
میزان بازیابی:
ادرار خوک، گوشت خوک 90٪ ± 30٪
3. اجزاء
| 1 | نوارهای میکرو چاه |
12 نوار با 8 نوار قابل جدا شدن چاه هر کدام |
|
| 2 | 6× محلول استاندارد (هر یک میلی لیتر) | 0ppb | 0.1ppb |
| 0.3ppb | 0.9ppb | ||
| 2.7ppb | 8.1ppb | ||
| 3 | مزدوج آنزیمی | 7 میلی لیتر | کلاه قرمز |
| 4 | محلول کار آنتی بادی | 10 میلی لیتر | کلاه آبی |
| 5 | بستر A | 7 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 6 | بستر B | 7 میلی لیتر | کلاه سیاه |
| 7 | راه حل را متوقف کنید | 7 میلی لیتر | کلاه زرد |
| 8 | بافر شستشوی غلیظ 20× | 40 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 9 | 5× محلول استخراج نمونه | 50 میلی لیتر | کلاه شفاف |
4. مواد مورد نیاز اما ارائه نشده است
1) تجهیزات: میکروپلیت خوان، چاپگر، هموژنایزر، گرداب، نوسان ساز، سانتریفیوژ، انکوباتور، پیپت های اندازه گیری، تعادل (حساسیت متقابل 0.01 گرم)
2) میکروپیپتورها: تک کانال 20-200μL، 100-1000μL و چند کانال 30-300μL.
3) معرف ها: NaOH، HCI.
5. نمونه قبل از درمان
دستورالعمل (قبل از درمان باید به نکات زیر توجه شود)
1) فقط نوک های یکبار مصرف را می توان برای آزمایش ها استفاده کرد و هنگام استفاده برای جذب معرف های مختلف، نوک ها باید تغییر کنند.
2) قبل از انجام آزمایش، هر ظروف آزمایشی باید تمیز باشد و در صورت لزوم مجدداً تمیز شود تا از آلودگی هایی که با نتایج آزمایش تداخل می کند جلوگیری شود.
آماده سازی محلول قبل از پیش تیمار نمونه:
1) 0.2M HCI: 17.2mL HCI را در آب دیونیزه شده به 1L حل کنید.
2) 1 مولار NaOH: 4 گرم NaOH را در آب یونیزه شده تا 100 میلی لیتر حل کنید.
3) محلول استخراج نمونه: 1 قسمت محلول استخراج نمونه 5X + 4 قسمت آب دیونیزه شده، به طور مساوی مخلوط کنید.
5.1 ادرار خوک
20 میکرولیتر ادرار شفاف بگیرید، مستقیماً آن را تشخیص دهید (اگر ادرار گل آلود است، باید فیلتر یا سانتریفیوژ با سرعت 4000 دور در دقیقه به مدت 10 دقیقه انجام دهید، سپس ادرار شفاف بگیرید).در صورت عدم استفاده در محیط یخ زده نگهداری شود.
رقیق شدن نمونه: 1
5.2 گوشت خوک
1. 2±0.05 گرم نمونه بافت هموژنیزه شده را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتری وزن کنید، 3 میلی لیتر HCl 0.2M اضافه کنید، به مدت 3 دقیقه تکان دهید.
2. سپس 600 ul 1M محلول NaOH و 2.4ml محلول استخراج نمونه اضافه کنید، به مدت 3 دقیقه تکان دهید، سانتریفیوژ کنید با سرعت 4000 r/min در دمای اتاق (20-25 ℃) به مدت 10 دقیقه.
3. 20 میکرولیتر مایع لایه بالا را برای تجزیه و تحلیل بردارید. (توجه: اگر بعد از سانتریفیوژ یک لایه چربی وجود دارد، لایه چربی را بردارید یا لایه چربی جدا کنید، مایع شفاف را برای تجزیه و تحلیل بردارید)
برابر رقت نمونه: 4
6. روش های الایزا
6.1 دستورالعمل
1. قبل از استفاده، تمام معرف ها و نوارهای ریز چاه را به دمای اتاق (20-25 ℃) برسانید.
2. بلافاصله پس از استفاده تمام معرف ها را به 2-8 ℃ برگردانید.
3. تکرارپذیری آنالیز ELISA تا حد زیادی به قوام شستشوی صفحه بستگی دارد.عملکرد صحیح شستشوی صفحه نکته کلیدی در روش های الایزا است.
4. برای انکوباسیون در دمای ثابت، تمام نمونه ها و معرف ها باید از قرار گرفتن در معرض نور اجتناب کنند و هر میکروپلیت باید توسط غشای پوششی مهر و موم شود.
6.2 رویه های عملیاتی
1. کیت تست را حداقل به مدت 30 دقیقه به دمای اتاق (20-25 ℃) بیاورید، توجه داشته باشید که هر معرف باید قبل از استفاده به طور یکنواخت تکان داده شود.
2. نوارهای ریز چاهک مورد نیاز را در قاب های صفحه قرار دهید.میکروپلیت استفاده نشده را مجدداً مهر و موم کنید، در دمای 2-8 ℃ نگهداری شود، یخ زده نباشد.
3. بافر شستشوی غلیظ 40 میلی لیتری 20X را در 1:19 با آب دیونیزه رقیق کنید (1 قسمت بافر شستشو غلیظ 20X + 19 قسمت آب دیونیزه).یا به مقدار لازم تهیه کنید.
4. شماره گذاری: ریز چاه ها را با توجه به نمونه ها و محلول استاندارد شماره گذاری کنید.هر نمونه و محلول استاندارد باید در دو نسخه انجام شود.موقعیت های خود را ثبت کنند.
5. 20 میکرولیتر از نمونه یا محلول استاندارد را به چاهک های تکراری جداگانه اضافه کنید، سپس آنزیم مزدوج را به مقدار 50 ul/ چاه اضافه کنید.سپس محلول کار آنتی بادی، 80 میکرولیتر در چاه را اضافه کنید.با تکان دادن دستی صفحه را به آرامی مخلوط کنید، میکروپلیت را با غشای پوششی ببندید، در دمای 25 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه انکوبه کنید.
6. مایع را از ریز چاه بریزید، 250 میکرولیتر در چاه بافر شستشو اضافه کنید، 4 تا 5 بار، هر بار 15 تا 30 ثانیه بشویید، سپس بیرون بیاورید و با کاغذ جاذب بپوشانید تا خشک شود (اگر بعد از زدن حباب ها وجود داشت، آنها را برش دهید. با نکات تمیز).
7. رنگ آمیزی: 50 میکرولیتر از بستر A اضافه کنید، سپس 50 میکرولیتر بستر B را به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن دستی بشقاب را به آرامی مخلوط کرده و در دمای 25 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه در تاریکی قرار دهید تا رنگ شود.
8. تعیین: 50 میکرولیتر از محلول توقف را به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن دستی صفحه را به آرامی مخلوط کنید.طول موج میکروپلیت خوان را روی 450 نانومتر تنظیم کنید تا مقدار OD هر چاه را تعیین کنید.(توصیه می شود مقدار OD را در طول موج دوگانه 450/630 نانومتر در عرض 5 دقیقه بخوانید).
7. قضاوت نتیجه
دو روش برای قضاوت در مورد نتایج وجود دارد.اولی قضاوت تقریبی است، در حالی که دومی تعیین کمی است.توجه داشته باشید که مقدار OD نمونه با غلظت β آگونیست ها در نمونه همبستگی منفی دارد.
7.1 تعیین کیفی
محدوده غلظت (ng/mL) که از مقایسه میانگین مقدار OD نمونه با محلول استاندارد بدست می آید.با فرض اینکه مقدار OD نمونه Ⅰ 0.3 و نمونه Ⅱ 1.0 باشد، مقدار OD محلول های استاندارد است: 2.243 برای ppb 0، 1.816 برای 0.1ppb، 1.415 برای 0.3ppb، 0.73 برای 0.3ppb، 0.73 برای 0.9ppb. 2.7ppb، 0.155 برای 8.1ppb، بر این اساس محدوده غلظت نمونه Ⅰ 2.7 تا 8.1ppb است و نمونه Ⅱ 0.3 تا 0.9ppb است.
7.2 تعیین کمی
مقادیر متوسط مقادیر جذب بدست آمده برای مقدار متوسط OD (B) نمونه و محلول استاندارد تقسیم بر مقدار OD (B0) اولین محلول استاندارد (0 استاندارد) و متعاقباً در 100٪ ضرب می شود.
| درصد مقدار جذب = | ب | × 100% |
| B0 |
B-میانگین (چاهک دوگانه) مقدار OD نمونه یا محلول استاندارد
B0 - مقدار متوسط OD محلول استاندارد 0ng/mL
منحنی استاندارد را با درصد جذب محلول های استاندارد و مقادیر نیم لگاریتمی محلول های استاندارد β-اگونیست (ng/mL) به ترتیب به عنوان محور Y و X رسم کنید.غلظت متناظر نمونه را از منحنی استاندارد با وارد کردن درصد جذب آن در منحنی استاندارد بخوانید.مقدار حاصل متعاقبا در برابر رقت ضرب می شود و در نهایت غلظت β آگونیست ها در نمونه بدست می آید.
8. اقدامات احتیاطی
1. دمای اتاق زیر 25 ℃ یا دمای معرف ها و نمونه ها به دمای اتاق (20-25 ℃) بر نمی گردند، منجر به یک مقدار استاندارد OD پایین تر می شود.
2. خشکی میکروپلیت در فرآیند شستشو با شرایطی از جمله منحنی های استاندارد غیر خطی و تکرارپذیری نامطلوب همراه خواهد بود.بنابراین بلافاصله پس از شستشو به مرحله بعدی ادامه دهید.
3. به طور مساوی مخلوط کنید، در غیر این صورت تکرارپذیری نامطلوب وجود خواهد داشت.
4. محلول توقف محلول اسید سولفوریک 2 مولار است، از تماس با پوست خودداری کنید.
5. از کیت بیش از تاریخ انقضای آن استفاده نکنید.استفاده از معرف های رقیق شده یا تقلبی از کیت ها منجر به تغییر در حساسیت و تشخیص مقادیر OD می شود.معرف ها را از کیت های شماره های مختلف برای استفاده تعویض نکنید.
6. میکروپلیت استفاده نشده را در یک کیسه آب بندی خودکار قرار دهید تا دوباره آب بندی شود.ماده استاندارد و رنگ بی رنگ حساس به نور است و بنابراین نمی توان آنها را مستقیماً در معرض نور قرار داد.
7. محلول رنگی را با هر رنگی که نشان دهنده انحطاط این محلول است دور بریزید.مقدار تشخیص محلول استاندارد 0 (ppb 0) کمتر از 0.5 نشان دهنده انحطاط آن است.
8. دمای واکنش بهینه 25 ℃ است و دمای خیلی بالا یا خیلی پایین باعث تغییر در حساسیت تشخیص و مقادیر OD می شود.
9. تاریخ نگهداری و انقضا
ذخیره سازی: در دمای 2 تا 8 ℃، یخ زده نگهداری شود.
تاریخ انقضا: 12 ماه;تاریخ تولید روی جعبه درج شده است
نکات: اگر پکیج وکیوم صفحات میکروتیتر دارای نشتی باشد، صفحه میکروتیتر نرمال و موثر است، در نتیجه آزمایش تاثیری نداشته باشید.لطفا با خیال راحت استفاده کنید.
Q1: چه زمانی ارسال می شود؟
A1: ما کالا را در اسرع وقت ظرف 7 روز کاری پس از دریافت پرداخت برای شما ارسال می کنیم.(در صورت وجود عوامل خارجی مانند اپیدمی، ممکن است زایمان به تاخیر بیفتد)
Q2: آیا از OEM/ODM پشتیبانی می کند؟
A2: می توان آن را پشتیبانی کرد، اما مقدار خاص باید بیش از 100000 قطعه باشد، که برای محصولات سفارشی مناسب است.
Q3: کارخانه شما از نظر کنترل کیفیت چگونه است؟
A3: ما گواهینامه ملی ISO9001 و ISO13485 را داریم.فرآیند تولید ما مطابق با روش های استاندارد برای اطمینان از کیفیت مطلوب محصول است.
Q4: چگونه خدمات پس از فروش را ارائه دهیم؟
A4: ما خدمات پس از فروش فنی آنلاین حرفه ای را ارائه می دهیم.ما می توانیم از طریق ویدئو، تلفن و غیره به شما راهنمایی های تک به تک ارائه دهیم.
Q5: روش پرداخت چیست؟
A5: ما پرداخت را توسط T/T دریافت می کنیم.
Q6: چگونه حمل کنیم؟
A6: بهترین روش حمل و نقل را با دریافت قیمت از بسیاری از شرکت های حمل و نقل تعاونی ما انتخاب کنید و همچنین مطابق با نیاز خود ارسال کنید.