به بهبود ادامه دهید
| محل منبع: | چین |
|---|---|
| نام تجاری: | Green Spring |
| گواهی: | ISO13485,ISO9001 |
| شماره مدل: | LSY-10001 |
| مقدار حداقل تعداد سفارش: | 1 کیت |
| قیمت: | negotiable |
| زمان تحویل: | 7 تا 14 روز |
| شرایط پرداخت: | T/T |
| قابلیت ارائه: | 100000 تست در روز |
| عملکرد نمونه: | ماهی، میگو، مرغ، جگر، عسل، تخم مرغ، شیر | حساسیت (ppb): | 0.03 ppb |
|---|---|---|---|
| مشخصات: | 96 چاه / کیت | کلید واژه ها: | کیت تست Nitrofuran AMOZ ELISA |
| تایپ کنید: | کیت تشخیصی الایزا | اندازه: | 16.7 * 11.5 * 10.2 سانتی متر |
| ماندگاری: | 12 ماه | ذخیره سازی: | در دمای 2-8 ℃، یخ زده نگهداری کنید. |
| برجسته کردن: | کیت ELISA تشخیصی میگو 96 Wells/Kit AMOZ Diagnostic ELISA Kit 0.03ppb کیت تشخیصی ELISA 96Wells/Kit,تست ایمنی مواد غذایی 96Wells/Kit 0.03ppb,0.03ppb Diagnostic ELISA Kit 96Wells/Kit,food safety test 96Wells/Kit 0.03ppb |
||
کیت الایزا تشخیصی Nitrofuran AMOZ برای حساسیت شیر 0.03ppb 96Wells/Kit
1.کیت تشخیصی الایزااصل
این کیت تشخیص مبتنی بر یک آنزیم ایمونواسی رقابتی برای تشخیص AMOZ در نمونه ها است.آنتی ژن های کونژوگه از قبل روی نوارهای میکرو چاه پوشانده می شوند.AMOZ در نمونه با آنتی ژن کونژوگه که از قبل روی نوار میکرووله پوشانده شده برای آنتی بادی ضد AMOZ رقابت می کند.پس از افزودن آنزیم مزدوج، بستر TMB برای رنگ‌آمیزی اضافه می‌شود.مقدار چگالی نوری (OD) یک نمونه با AMOZ موجود در آن همبستگی منفی دارد.این مقدار با یک منحنی استاندارد مقایسه می شود و غلظت AMOZ متعاقباً به دست می آید.
2. مشخصات فنی
حساسیت: 0.03ppb
دمای جوجه کشی: 25 ℃
زمان جوجه کشی: 30 دقیقه تا 15 دقیقه
حد تشخیص بافت، تخم مرغ، عسل: 0.1ppb
نرخ واکنش متقاطع
AMOZ 100%
AHD < 0.1٪
AOZ < 0.1٪
SEM <0.1٪
نرخ بازیابی
بافت 80 ± 25٪
عسل 25 ± 75 درصد
تخم مرغ 25 ± 95 درصد
3.کیت تست ایمنی مواد غذایی Nitrofuran AMOZ ELISAاجزاء
| 1 | نوارهای میکرو چاه |
12 نوار با 8 نوار قابل جدا شدن چاه هر کدام |
|
| 2 | 6× محلول استاندارد (هر یک میلی لیتر) | 0ppb | 0.03ppb |
| 0.09ppb | 0.27ppb | ||
| 0.81ppb | 2.43ppb | ||
| 3 | مزدوج آنزیمی | 7 میلی لیتر | کلاه قرمز |
| 4 | محلول کار آنتی بادی | 7 میلی لیتر | کلاه آبی |
| 5 | بستر A | 7 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 6 | بستر B | 7 میلی لیتر | کلاه سیاه |
| 7 | راه حل را متوقف کنید | 7 میلی لیتر | کلاه زرد |
| 8 | بافر شستشوی غلیظ 20× | 40 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 9 | 2× محلول حل مجدد غلیظ | 50 میلی لیتر | کلاه شفاف |
| 10 | 2-نیتروبنزلدئید (C7H5NO3) | 2-نیتروبنزلدئید (C7H5NO3) | 2-نیتروبنزلدئید (C7H5NO3) |
4. مواد مورد نیاز اما ارائه نشده است
1) تجهیزات: میکروپلیت خوان، چاپگر، هموژنایزر، خشک کن نیتروژن، گرداب، سانتریفیوژ، لوله اندازه گیری، تعادل (0.01 گرم متقابل)، انکوباتور، حمام آب؛
2) میکروپیپت ها: تک کانال 20-200 میکرولیتر، 100-1000 میکرولیتر، چند کانال 30-300 میکرولیتر.
3) معرف ها: NaOH، اتیل استات، n-هگزان، HCl (حدود 36.5٪)، K2HPO4 3H2O
5. آماده سازی نمونه
دستور دادن
قبل از هر نوع پیش تصفیه نمونه باید به نکات زیر توجه شود:
1) آزمایش فقط می تواند از نوک های یکبار مصرف استفاده کند و هنگام آسپیراسیون معرف های مختلف، نوک ها باید جایگزین شوند.
2) قبل از آزمایش، هر یک از تجهیزات آزمایشی باید تمیز و در صورت لزوم دوباره تمیز شوند تا از آلودگی با نتایج آزمایش جلوگیری شود.
آماده سازی محلول قبل از پیش تیمار نمونه:
1) 0.1 مولار K2HPO4: 11.4 گرم K2HPO4 3H2O را در آب دیونیزه شده تا 500 میلی لیتر حل کنید.
2) 1 مولار هیدروکلراید: 6/8 میلی لیتر HCl (حدود 5/36 درصد) را در آب دیونیزه شده تا 100 میلی لیتر حل کنید.
3) 1 مولار NaOH: 4 گرم NaOH را در آب دیونیزه شده تا 100 میلی لیتر حل کنید.
4) محلول حل مجدد غلیظ 2× را با آب دیونیزه به نسبت 1:1 (1 میلی لیتر محلول حل مجدد غلیظ + 1 میلی لیتر آب دیونیزه) برای حل مجدد نمونه رقیق کنید.
5.1 آماده سازی نمونه
آ)بافت، تخم مرغ
1) 0.05±1 گرم از نمونه همگن را وزن کنید، 4 میلی لیتر آب مقطر، 0.5 میلی لیتر HCl 1 مولار و 100 میکرولیتر 2-نیتروبنزلدئید (C7H5NO3) به هر لوله اضافه کنید و به مدت 2 دقیقه به طور مناسب تکان دهید.
2) یک شب در دمای 37 درجه سانتیگراد (حدود 16 ساعت) یا در حمام آب در دمای 56 درجه سانتیگراد (2 ساعت) انکوبه کنید.
3) 5 میلی لیتر K2HPO4 0.1 مولار، 0.4 میلی لیتر NaOH 1 مولار و 6 میلی لیتر اتیل استات به هر لوله اضافه کنید و به مدت 30 ثانیه تکان دهید.
4) در دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) بالای 4000r/min به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید (اگر امولسیون وجود دارد یا لایه اتیل استات کمتر از 3 میلی لیتر است، نمونه را در حمام آب در دمای 80 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه انکوبه کنید و سانتریفیوژ کنید. به طور مکرر؛ یا سرعت را افزایش دهید و زمان سانتریفیوژ را طولانی کنید).
5) لایه 3 میلی لیتر اتیل استات را به یک لوله سانتریفیوژ جدید منتقل کنید و با نیتروژن یا هوا در دمای 50 درجه سانتیگراد تا خشک شدن تبخیر کنید.
6) باقیمانده خشک شده را در 2 میلی لیتر هگزان n-هگزان حل کنید، 1 میلی لیتر از محلول رقیق شده را اضافه کنید، به مدت 30 ثانیه خوب مخلوط کنید، در دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) با سرعت بیش از 4000 دور در دقیقه به مدت 10 سانتریفیوژ کنید. دقایق؛فاز n-هگزان بالایی را حذف کنید.(اگر امولسیون رخ داد، فاز n-هگزان بالایی را بردارید، نمونه را در یک حمام آب 70 درجه سانتیگراد به مدت 10-20 دقیقه انکوبه کنید و مکررا سانتریفیوژ کنید).
7) 50 میکرولیتر از لایه زیرین را برای تجزیه و تحلیل بردارید.
ضریب رقت نمونه: 2
ب) عسل
1) 0.05±2 گرم نمونه همگن (عسل) را وزن کنید، 4 میلی لیتر آب مقطر، 0.5 میلی لیتر هیدروکلراید 1 مولار و 100 میکرولیتر 2-نیتروبنزلدئید (C7H5NO3) به هر لوله اضافه کنید، به مدت 2 دقیقه به طور مناسب تکان دهید.
2) یک شب در دمای 37 درجه سانتیگراد (حدود 16 ساعت) یا در حمام آب در دمای 56 درجه سانتیگراد (2 ساعت) انکوبه کنید.
3) 5 میلی لیتر K2HPO4 0.1 مولار، 0.4 میلی لیتر NaOH 1 مولار و 6 میلی لیتر اتیل استات به هر لوله اضافه کنید و به مدت 30 ثانیه تکان دهید.
4) در دمای اتاق (25-20 درجه سانتی گراد) بالای 4000r/min به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید (اگر امولسیون وجود دارد یا لایه اتیل استات کمتر از 3 میلی لیتر است، نمونه را به طور مکرر در حمام آب در دمای 80 درجه سانتی گراد به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید؛ یا افزایش سرعت و طولانی شدن زمان سانتریفیوژ).
5) لایه 3 میلی لیتر اتیل استات را به یک لوله سانتریفیوژ جدید منتقل کنید و با نیتروژن یا هوا در دمای 50 درجه سانتیگراد تا خشک شدن تبخیر کنید.
6) باقیمانده خشک شده را در 2 میلی لیتر هگزان n-هگزان حل کنید، 1 میلی لیتر محلول رقیق شده را اضافه کنید، به مدت 30 ثانیه خوب مخلوط کنید، در دمای اتاق (25-20 درجه سانتیگراد) با سرعت 4000 دور در دقیقه یا بیشتر سانتریفیوژ کنید. 10 دقیقه؛فاز n-هگزان بالایی را حذف کنید.(اگر امولسیون رخ داد، فاز n-هگزان بالایی را بردارید، نمونه را در یک حمام آب 70 درجه سانتیگراد به مدت 10-20 دقیقه انکوبه کنید و مکررا سانتریفیوژ کنید).
7) 50 میکرولیتر از لایه زیرین را برای تجزیه و تحلیل بردارید.
ضریب رقت نمونه: 1
6. روش الایزا
6.1 توضیحات
1) قبل از استفاده، همه معرف ها و نوارهای ریز چاه را به دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) برسانید.
2) تمام معرف ها را بلافاصله پس از استفاده به 2-8 درجه سانتیگراد برگردانید.
3) تکرارپذیری سنجش الایزا تا حد زیادی به قوام شستشوی صفحه بستگی دارد.عملکرد صحیح شستشوی صفحه کلید روش الایزا است.
4) در طول انکوباسیون دمای ثابت، تمام نمونه ها و معرف ها باید از نور محافظت شوند و هر میکروپلیت باید با یک فیلم پوششی مهر و موم شود.
6.2 رویه عملیاتی
1) کیت را حداقل به مدت 30 دقیقه در دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) قرار دهید، توجه داشته باشید که هر معرف قبل از استفاده باید تکان داده شده و به خوبی مخلوط شود و نوارهای میکرووله مورد نیاز را در قاب صفحه قرار دهید.میکروپلیت های استفاده نشده باید دوباره بسته شوند و در دمای 8-2 درجه سانتیگراد نگهداری شوند، نه منجمد.
2) آماده سازی محلول: 40 میلی لیتر بافر شستشوی غلیظ 20 × رقیق شده 1:19 با آب دیونیزه (1 قسمت 20 × بافر شستشو غلیظ + 19 قسمت آب دیونیزه).یا در صورت نیاز آماده کنید.
3) شماره گذاری: ریز چاه ها را با توجه به نمونه ها و محلول های استاندارد شماره گذاری کنید.هر نمونه و محلول استاندارد باید در دو نسخه ساخته شده و موقعیت آنها ثبت شود.
4) 50 میکرولیتر نمونه یا محلول استاندارد را برای جداسازی چاه های تکراری اضافه کنید.50 میکرولیتر از آنزیم مزدوج را به هر چاهک اضافه کنید، سپس 50 میکرولیتر محلول آنتی بادی را اضافه کنید و صفحه را با دست تکان دهید تا به آرامی مخلوط شود.میکروپلیت را با یک فیلم پوششی ببندید و به مدت 30 دقیقه در دمای 25 درجه سانتیگراد انکوبه کنید.
5) مایع را در میکرووله بریزید، روی کاغذ جاذب خشک کنید، 250 میکرولیتر در چاه بافر شستشو اضافه کنید تا صفحه میکرووله به مدت 15 تا 30 ثانیه بشویید، سپس خارج کرده و با کاغذ جاذب خشک کنید، 4 تا 5 بار تکرار کنید.(اگر بعد از ضربه زدن حباب های هوا وجود داشت با نوک تمیز آن ها را قطع کنید).
6) توسعه رنگ: 50 میکرولیتر از بستر A را به هر چاهک اضافه کنید، سپس 50 میکرولیتر از بستر B را به آرامی با دست تکان دهید، سپس در تاریکی در دمای 25 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه انکوبه کنید تا رنگ ایجاد شود.
7) سنجش: 50 میکرولیتر محلول توقف را به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن بشقاب با دست به آرامی مخلوط کنید.برای تعیین مقدار OD هر چاهک، طول موج میکروپلیت خوان را روی 450 نانومتر تنظیم کنید.(توصیه می شود مقادیر OD را در طول موج های دوگانه 450/630 نانومتر در عرض 5 دقیقه بخوانید).
7. قضاوت نتیجه
دو روش برای قضاوت در مورد نتایج وجود دارد: اولی قضاوت تقریبی و دومی تعیین کمی است.توجه داشته باشید که مقدار OD نمونه با غلظت AMOZ همبستگی منفی دارد.
7.1 تعیین کیفی
محدوده غلظت (ng/mL) AMOZ را می توان از مقایسه میانگین مقدار OD نمونه با محلول استاندارد بدست آورد.با فرض اینکه مقدار OD نمونهⅠ 0.3 و مقدار نمونه Ⅱ 1.0 باشد، مقدار OD محلول های استاندارد است: 2.243 برای 0ppb، 1.816 برای 0.03ppb، 1.415 برای 0.09ppb، 0.71 برای ppb3، 0.74 برای 0.07ppb3. 0.155 برای 2.43ppb، بر این اساس محدوده غلظت نمونه Ⅰ 0.81 تا 2.43ppb است و نمونه Ⅱ 0.09 تا 0.27ppb است.
7.2 تعیین کمی
مقادیر متوسط مقادیر جذب برای میانگین مقدار OD (B) نمونه و محلول استاندارد تقسیم بر مقدار OD (B0) اولین محلول استاندارد (0 استاندارد) بدست می آید و متعاقباً در 100٪ ضرب می شود. ،
| درصد مقدار جذب = | ب | × 100% |
| B0 |
ب - مقدار متوسط OD نمونه یا محلول استاندارد
B0 - مقدار متوسط OD محلول استاندارد 0ng/mL
منحنی استاندارد را با درصدهای جذب محلول استاندارد و مقادیر نیم لگاریتمی محلول استاندارد AMOZ (ng/mL) به ترتیب به عنوان محور Y و X رسم کنید.غلظت متناظر نمونه را از منحنی استاندارد با وارد کردن درصد جذب آن در منحنی استاندارد بخوانید.مقدار حاصل متعاقباً در برابر رقت مربوطه ضرب می شود و در نهایت غلظت AMOZ در نمونه بدست می آید.
8. مسائلی که نیاز به توجه دارند
1) دمای اتاق کمتر از 25 درجه سانتیگراد است یا دمای معرف و نمونه به دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) برنگشته است که باعث کاهش مقدار استاندارد OD می شود.
2) در طول فرآیند شستشو، خشک شدن میکروپلیت با غیر خطی بودن منحنی استاندارد و تکرارپذیری نامطلوب همراه خواهد بود.بنابراین بلافاصله پس از شستشو به مرحله بعدی بروید.
3) خوب مخلوط کنید، در غیر این صورت تکرارپذیری ضعیفی وجود خواهد داشت.
4) محلول استاپ محلول اسید سولفوریک 2 مولار است، از تماس با پوست خودداری کنید.
5) از کیت بیشتر از تاریخ انقضا استفاده نکنید.استفاده از معرف های رقیق شده یا تقلبی از کیت می تواند منجر به تغییر در حساسیت و تشخیص مقادیر OD شود.معرف های دسته های مختلف کیت را جایگزین نکنید.
6) میکروپلیت های استفاده نشده را در کیسه های خود آب بندی مجدد ببندید.محلول های استاندارد و کوپلرهای بی رنگ به نور حساس هستند و نمی توانند مستقیماً در معرض نور قرار گیرند.
7) محلول رنگی که رنگ آن نشان دهنده تحلیل رفتن محلول باشد را دور بریزید.مقدار تشخیص کمتر از 0.5 برای محلول استاندارد 1 (0 ppb) نشان دهنده تخریب است.
8) دمای واکنش بهینه 25 درجه سانتیگراد است و حساسیت تشخیص و مقدار OD در صورتی که دما خیلی زیاد یا خیلی کم باشد تغییر می کند.
9. مدت زمان نگهداری و اعتبار
نحوه نگهداری: در دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد نگهداری شود، از یخ زدن خودداری شود.
تاریخ انقضا: 12 ماه;تاریخ تولید روی جعبه درج شده است.
توجه: اگر بسته بندی خلاء میکروپلیت نشتی داشته باشد، همچنان می توان بدون تأثیر بر نتایج آزمایش از آن استفاده کرد، بنابراین می توانید با اطمینان از آن استفاده کنید.
Q1: چه زمانی ارسال می شود؟
A1: ما کالا را در اسرع وقت ظرف 7 روز کاری پس از دریافت پرداخت برای شما ارسال می کنیم.(در صورت وجود عوامل خارجی مانند اپیدمی، ممکن است زایمان به تاخیر بیفتد)
Q2: آیا از OEM/ODM پشتیبانی می کند؟
A2: می توان آن را پشتیبانی کرد، اما مقدار خاص باید بیش از 100000 قطعه باشد، که برای محصولات سفارشی مناسب است.
Q3: کارخانه شما از نظر کنترل کیفیت چگونه است؟
A3: ما گواهینامه ملی ISO9001 و ISO13485 را داریم.فرآیند تولید ما مطابق با روش های استاندارد برای اطمینان از کیفیت مطلوب محصول است.
Q4: چگونه خدمات پس از فروش ارائه کنیم؟
A4: ما خدمات پس از فروش فنی آنلاین حرفه ای را ارائه می دهیم.ما می توانیم از طریق ویدئو، تلفن و غیره به شما راهنمایی های تک به تک ارائه دهیم.
Q5: روش پرداخت چیست؟
A5: ما پرداخت را توسط T/T دریافت می کنیم.
Q6: چگونه حمل کنیم؟
A6: بهترین روش حمل و نقل را با دریافت قیمت از بسیاری از شرکت های حمل و نقل تعاونی ما انتخاب کنید و همچنین مطابق با نیاز خود ارسال کنید.