به بهبود ادامه دهید
| محل منبع: | چین |
|---|---|
| نام تجاری: | Green Spring |
| گواهی: | ISO13485,ISO9001 |
| شماره مدل: | LSY-10034 |
| مقدار حداقل تعداد سفارش: | 1 کیت |
| قیمت: | negotiable |
| زمان تحویل: | 7 تا 14 روز |
| شرایط پرداخت: | T/T |
| قابلیت ارائه: | 100000 تست در روز |
| مشخصات: | 96 چاه / کیت | حساسیت: | 0.1ppb |
|---|---|---|---|
| نرخ واکنش متقاطع: | اکراتوکسین A 100% | زمان انکوباتور: | 30 دقیقه تا 30 دقیقه تا 15 دقیقه |
| عملکرد نمونه: | خوراک، دانه | ماندگاری: | 12 ماه؛ تاریخ تولید روی جعبه درج شده است |
| کلید واژه ها: | کیت تست الایزا اکراتوکسین A (OTA). | تایپ کنید: | کیت های تست مایکوتوکسین |
| برجسته کردن: | کیت تست سریع مایکوتوکسین دانه 15 دقیقه,کیت تست سریع مایکوتوکسین حساسیت 0.1 Ppb,تست مایکوتوکسین اکراتوکسین |
||
کیت تست Ochratoxin A ELISA برای Feed Grain 96 Wells/Kit Sensitivity 0.1ppb
1. اصل و کاربرد
اکراتوکسین یک متابولیت ثانویه است که توسط گونه های خاصی از جنس Aspergillus و Penicillium تولید می شود.در این میان، اکراتوکسین A بیشترین پراکندگی در طبیعت را دارد و قوی ترین سمیت را دارد و بیشترین تأثیر را بر انسان، حیوانات و گیاهان دارد.
این کیت از ELISA رقابتی غیرمستقیم برای تشخیص اکراتوکسین (Ochratoxins A, OTA) در غلات و نمونه‌های خوراک مانند رشته فرنگی برنج، بادام زمینی و دانه‌های سویا استفاده می‌کند.این کیت شامل صفحه آنتی ژن و آنزیم مزدوج از قبل پوشش داده شده، آنتی بادی ها، استانداردها و سایر معرف های حمایتی است.در طول آزمایش، محلول استاندارد یا نمونه اضافه می شود، اکراتوکسین موجود در نمونه و آنتی ژن از پیش پوشش داده شده روی صفحه برای رقابت با آنتی بادی اکراتوکسین، و پس از افزودن آنزیم مزدوج، از طریق بستر TMB رنگ، مقادیر جذب نمونه را نشان می دهد. اکراتوکسین با محتوای آن همبستگی منفی دارد، در مقایسه با منحنی استاندارد و سپس ضرب در ضریب رقت مربوطه، می تواند محتوای اکراتوکسین را در نمونه ها ترسیم کند.
2. مشخصات فنی
حساسیت: 0.1ppb (ng/ml)
جوجه کشی: 37 ℃، 30 دقیقه تا 30 دقیقه تا 15 دقیقه
حد تشخیص:
دانه 1ppb
خوراک 2ppb
نرخ واکنش متقاطع
اکراتوکسین A 100%
میزان بازیابی:
دانه، خوراک 15±85 درصد
3. اجزاء
| 1 | نوارهای میکرو چاه OTA | 12 نوار با 8 چاه قابل جابجایی هر کدام | |
| 2 | 6× محلول استاندارد (هر یک میلی لیتر) | 0ppb | 0.1ppb |
| 0.3ppb | 0.9ppb | ||
| 2.7ppb | 8.1ppb | ||
| 3 | مزدوج آنزیمی | 11 میلی لیتر | کلاه قرمز |
| 4 | محلول کار آنتی بادی | 5.5 میلی لیتر | کلاه آبی |
| 5 | بستر A | 6 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 6 | بستر B | 6 میلی لیتر | کلاه سیاه |
| 7 | راه حل را متوقف کنید | 6 میلی لیتر | کلاه زرد |
| 8 | بافر شستشو غلیظ 20X | 40 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 9 | دستورالعمل | 1 قطعه | |
4. مواد مورد نیاز اما ارائه نشده است
1) تجهیزات: ELISA reader (450nm/630nm)، چاپگر، گرداب (شکر اختیاری)، سانتریفیوژ، تعادل: 0.01 گرم به مقدار حساس، پیپت های مدرج، هموژنایزر.
2) میکروپیپت ها: تک کانال 20 میلی لیتر تا 200 میلی لیتر، 100 میلی لیتر تا 1000 میلی لیتر، چند کانال 300 میلی لیتر.
3) معرفها: متانول، NaHCO3، آب دیونیزه.
5. نمونه قبل از درمان
5.1 آماده سازی محلول قبل از پیش تیمار نمونه:
1) متانول 70 درصد
7 قسمت متانول + 3 قسمت آب دیونیزه.
2) محلول NaHCO3 0.1M
4.2 گرم NaHCO3 وزن کنید، آب دیونیزه شده را به 500 میلی لیتر اضافه کنید تا حل شود.
3) بافر شستشو
1 قسمت از بافر شستشو غلیظ 20X را با 19 قسمت آب دیونیزه حل کنید تا بافر شستشوی آماده برای استفاده به دست آید.
5.2 تهیه غلات (برنج، ذرت، ارزن و غیره)
1) 2 گرم نمونه همگن را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتر وزن کنید، 10 میلی لیتر متانول 70 درصد اضافه کنید، 5 دقیقه تکان دهید، سانتریفیوژ کنید با سرعت 4000 دور در دقیقه در دمای اتاق به مدت 10 دقیقه.
2) 1 میلی لیتر مایع شفاف لایه بالا را بردارید، 1 میلی لیتر محلول NaHCO3 0.1M اضافه کنید، تکان دهید تا یکنواخت شود.
3) 50 لیتر مایع را برای آزمایش بردارید
ضریب رقت: 10 حد تشخیص: 1ppb
5.3 آماده سازی خوراک
1) 2 گرم نمونه همگن را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتری وزن کنید، 20 میلی لیتر متانول 70 درصد اضافه کنید، به مدت 5 دقیقه تکان دهید، سانتریفیوژ کنید با سرعت 4000 دور در دقیقه در دمای اتاق به مدت 10 دقیقه.
2) 1 میلی لیتر مایع شفاف لایه بالا را بردارید، 1 میلی لیتر محلول NaHCO3 0.1M اضافه کنید، تکان دهید تا یکنواخت شود.
3) 50 لیتر مایع را برای آزمایش بردارید
ضریب رقت: 20 حد تشخیص: 2ppb
6. روش های الایزا
1) کیت تست را برای حداقل 30 دقیقه به دمای اتاق (20-25 ℃) بیاورید، بافر شستشو غلیظ 20X ممکن است در هنگام نگهداری در سرد تبلور داشته باشد، باید به دمای اتاق بازگردد تا کاملا حل شود.توجه داشته باشید که هر معرف باید قبل از استفاده به طور یکنواخت تکان داده شود.نوارهای ریز چاهک مورد نیاز را در قاب های صفحه قرار دهید.میکروپلیت استفاده نشده را دوباره مهر و موم کنید، در دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد نگهداری کنید، نه منجمد.
2) شماره گذاری: ریز چاه ها را با توجه به نمونه ها و محلول استاندارد شماره گذاری کنید.هر نمونه و محلول استاندارد باید در دو نسخه انجام شود.موقعیت های خود را ثبت کنند.
3) استاندارد/نمونه را اضافه کنید: 50 میکرولیتر از نمونه یا محلول استاندارد را به چاهک های تکراری جداگانه اضافه کنید، سپس محلول کار آنتی بادی، 50 میکرولیتر در چاه را اضافه کنید.با تکان دادن دستی صفحه را به آرامی مخلوط کنید، میکروپلیت را با غشای پوششی ببندید، در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه در تاریکی انکوبه کنید.
4) میکروپلیت را بشویید: غشای پوشش را با دقت باز کنید، مایع را از میکرو چاه بریزید.350 میکرولیتر در چاه بافر شستشو اضافه کنید، 5 بار، هر بار 30 ثانیه به طور کامل بشویید، سپس خارج کنید و با کاغذ جاذب بپوشانید تا خشک شود. (از نیزه استفاده نشده برای سوراخ کردن حباب پس از خشک شدن استفاده کنید)
5) افزودن کنژوگه آنزیم: مزدوج آنزیم را 100 میکرولیتر در چاه اضافه کنید.با تکان دادن دستی صفحه را به آرامی مخلوط کنید، میکروپلیت را با غشای پوششی ببندید، در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه در تاریکی انکوبه کنید.
به عنوان مرحله 4 بشویید).
6) رنگ: 50 میکرولیتر از بستر A و سپس 50 میکرولیتر بستر B را به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن دستی بشقاب را به آرامی مخلوط کرده و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه در تاریکی قرار دهید تا رنگ شود.(اگر رنگ آبی خیلی روشن است، زمان واکنش را می توان به طور مناسب افزایش داد)
7) تعیین: 50 میکرولیتر از محلول توقف را به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن دستی صفحه را به آرامی مخلوط کنید.طول موج میکروپلیت خوان را روی 450 نانومتر تنظیم کنید تا مقدار OD هر چاه را تعیین کنید.(توصیه می شود مقدار OD را در طول موج دوگانه 450/630 نانومتر در مدت 10 دقیقه بخوانید).
7. قضاوت نتیجه
برای محاسبه غلظت نمونه ها باید یک منحنی استاندارد ایجاد کرد.قبل از ایجاد منحنی استاندارد، مفهوم درصد جذب باید شناخته شود.
محاسبه درصد جذب:
| درصد مقدار جذب = | ب | × 100% |
| B0 |
ب - مقدار متوسط OD نمونه یا محلول استاندارد.
B0 - مقدار متوسط OD محلول استاندارد 0ng/mL.
بنابراین استاندارد صفر برابر با 100% ساخته شده و مقادیر جذب به صورت درصد ذکر شده است.مقادیر محاسبه شده برای استانداردها در یک سیستم مختصات بر روی کاغذ گراف نیمه لگاریتمی در برابر غلظت اکراتوکسین A [μg/kg] وارد می شود.غلظت اکراتوکسین A بر حسب میکروگرم بر کیلوگرم (ppb) مربوط به جذب هر نمونه را می توان از منحنی کالیبراسیون خواند.
یک نرم افزار ویژه برای تجزیه و تحلیل نتایج ELISA تعیین دو یا چندگانه را تسهیل می کند.در صورت نیاز لطفا برای درخواست تماس بگیرید.
8. اقدامات احتیاطی
1) دمای اتاق زیر 25 ℃ یا دمای معرف ها و بازنگشتن نمونه ها به دمای اتاق (25 ℃) منجر به کاهش استاندارد OD می شود.
2) خشکی میکروپلیت در فرآیند شستشو با شرایطی از جمله منحنی های استاندارد غیر خطی و تکرارپذیری نامطلوب همراه خواهد بود.بنابراین بلافاصله پس از شستشو به مرحله بعدی ادامه دهید.
3) قبل از افزودن هر معرف به طور یکنواخت مخلوط کنید.
4) محلول استاپ محلول اسید سولفوریک 2 مولار است، از تماس با پوست خودداری کنید.
5) از کیت بیش از تاریخ انقضای آن استفاده نکنید.استفاده از معرف های رقیق شده یا تقلبی از کیت ها منجر به تغییر در حساسیت و تشخیص مقادیر OD می شود.معرف ها را از کیت های شماره های مختلف برای استفاده تعویض نکنید.
6) ذخیره سازی: در دمای 2-8 ℃، یخ زده نگهداری کنید.میکروپلیت استفاده نشده را در یک کیسه آب بندی خودکار قرار دهید تا دوباره آب بندی شود.ماده استاندارد و رنگ بی رنگ حساس به نور است و بنابراین نمی توان آنها را مستقیماً در معرض نور قرار داد.
7) محلول رنگ آمیزی را با هر رنگی که نشان دهنده انحطاط این محلول باشد دور بریزید.مقدار تشخیص (450/630nm) محلول استاندارد 0 (0 ppb) کمتر از 0.5 ((A450nm<0.5)) نشان دهنده انحطاط آن است.
9. تاریخ نگهداری و انقضا
ذخیره سازی: در دمای 2 تا 8 ℃، یخ زده نگهداری شود.
تاریخ انقضا: 12 ماه;تاریخ تولید روی جعبه درج شده است
Q1: چه زمانی ارسال می شود؟
A1: ما کالا را در اسرع وقت ظرف 7 روز کاری پس از دریافت پرداخت برای شما ارسال می کنیم.(در صورت وجود عوامل خارجی مانند اپیدمی، ممکن است زایمان به تاخیر بیفتد)
Q2: آیا از OEM/ODM پشتیبانی می کند؟
A2: می توان آن را پشتیبانی کرد، اما مقدار خاص باید بیش از 100000 قطعه باشد، که برای محصولات سفارشی مناسب است.
Q3: کارخانه شما از نظر کنترل کیفیت چگونه است؟
A3: ما گواهینامه ملی ISO9001 و ISO13485 را داریم.فرآیند تولید ما مطابق با روش های استاندارد برای اطمینان از کیفیت مطلوب محصول است.
Q4: چگونه خدمات پس از فروش را ارائه دهیم؟
A4: ما خدمات پس از فروش فنی آنلاین حرفه ای را ارائه می دهیم.ما می توانیم از طریق ویدئو، تلفن و غیره به شما راهنمایی های تک به تک ارائه دهیم.
Q5: روش پرداخت چیست؟
A5: ما پرداخت را توسط T/T دریافت می کنیم.
Q6: چگونه حمل کنیم؟
A6: بهترین روش حمل و نقل را با دریافت قیمت از بسیاری از شرکت های حمل و نقل تعاونی ما انتخاب کنید و همچنین مطابق با نیاز خود ارسال کنید.