به بهبود ادامه دهید
| مشخصات: | 96 چاه / کیت | حساسیت: | 0.05ppb |
|---|---|---|---|
| نرخ واکنش متقاطع: | Trichothecenes (T-2) 100% | زمان انکوباتور: | 30-15 دقیقه |
| عملکرد نمونه: | خوراک، بادام زمینی، برنج | ماندگاری: | 12 ماه |
| کلید واژه ها: | کیت تست الایزا Trichothecenes (T-2). | تایپ کنید: | کیت های تست مایکوتوکسین |
| برجسته کردن: | تجهیزات تست آفلاتوکسین Trichothecenes,تجهیزات تست آفلاتوکسین T-2,کیت تست بادام زمینی 3ppb |
||
کیت تست ELISA Trichothecenes (T-2) برای خوراک برنج بادام زمینی 96 چاه/کیت
1. اصل
این کیت تست بر اساس آنزیم ایمونواسی رقابتی برای تشخیص تریکوتسن (T-2) است.آنتی ژن جفت کننده از قبل روی نوارهای ریز چاه پوشیده شده است.تریکوتسن ها (T-2) در نمونه و آنتی ژن های جفت کننده از پیش پوشش داده شده بر روی نوارهای ریز چاهک برای آنتی بادی های ضد تریکوتسن (T-2) رقابت می کنند.پس از افزودن آنزیم مزدوج، بستر TMB برای رنگ‌آمیزی اضافه می‌شود.مقدار چگالی نوری (OD) نمونه با تریکوتسن (T-2) در نمونه همبستگی منفی دارد.این مقدار با منحنی استاندارد مقایسه می شود و پس از آن باقیمانده های Trichothecenes (T-2) بدست می آید.
2. مشخصات فنی
حساسیت: 0.05ppb
دمای دستگاه جوجه کشی: 25 درجه سانتیگراد
زمان دستگاه جوجه کشی: 30 دقیقه تا 15 دقیقه
حد تشخیص:
خوراک، بادام زمینی، برنج 3ppb
نرخ واکنش متقاطع:
Trichothecenes (T-2) 100%
میزان بازیابی:
خوراک، برنج 25±90 درصد
بادام زمینی 25±85 درصد
3. اجزاء
| 1 | نوارهای میکرو چاه | 12 نوار با 8 چاه قابل جابجایی هر کدام | |
| 2 | 6× محلول استاندارد (هر یک میلی لیتر) | 0ppb | 0.05ppb |
| 0.15ppb | 0.45ppb | ||
| 1.35ppb | 4.05ppb | ||
| 3 | مزدوج آنزیمی | 7 میلی لیتر | کلاه قرمز |
| 4 | محلول کار آنتی بادی | 7 میلی لیتر | کلاه آبی |
| 5 | بستر A | 7 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 6 | بستر B | 7 میلی لیتر | کلاه سیاه |
| 7 | راه حل را متوقف کنید | 7 میلی لیتر | کلاه زرد |
| 8 | بافر شستشوی غلیظ 20× | 15 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 9 | 5× محلول حل مجدد غلیظ | 50 میلی لیتر * 2 | کلاه شفاف |
4. مواد مورد نیاز اما ارائه نشده است
1) تجهیزات: ELISA Reader (450 نانومتر/630 نانومتر)، هموژنایزر، شیکر، سانتریفیوژ، تعادل: 0.01 گرم حساس به مقدار، دستگاه خشک کن نیتروژن، انکوباتور، پیپت های مدرج، چاپگر
2) میکروپیپت ها: تک کانال 20 میلی لیتر ~ 200 میلی لیتر، 100 میلی لیتر تا 1000 میلی لیتر، چند کانال 30 تا 300 میکرولیتر
3) معرفها: متانول.
5. نمونه قبل از درمان
دستورالعمل (قبل از درمان باید به نکات زیر توجه شود)
1) فقط نوک های یکبار مصرف را می توان برای آزمایش ها استفاده کرد و هنگام استفاده برای جذب معرف های مختلف، نوک ها باید تغییر کنند.
2) قبل از انجام آزمایش، هر ظروف آزمایشی باید تمیز باشد و در صورت لزوم مجدداً تمیز شود تا از آلودگی هایی که با نتایج آزمایش تداخل می کند جلوگیری شود.
آماده سازی محلول قبل از پیش تیمار نمونه:
1) محلول حل کننده نمونه
از 1 قسمت از محلول حل مجدد غلیظ (5X) استفاده کنید و با 4 قسمت آب دیونیزه حل کنید تا محلول حل مجدد نمونه آماده استفاده به دست آید.
2) محلول عصاره نمونه
از 1 قسمت متانول استفاده کنید و با 1 قسمت از محلول حل مجدد نمونه حل کنید تا محلول آماده مصرف عصاره نمونه بدست آید.
تهیه نمونه خوراک، بادام زمینی، برنج
1) نمونه آسیاب شده 1.0±0.05 گرم را در لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتری بریزید، محلول عصاره نمونه 5 میلی لیتری را اضافه کنید، 3 دقیقه تکان دهید، سانتریفیوژ کنید با سرعت 4000r/min در دمای 20 درجه به مدت 10 دقیقه.
2) 100 لیتر مایع رویی (لایه بالا) بردارید، 400 لیتر محلول حل کننده نمونه اضافه کنید، تکان دهید تا یکنواخت شود.
3) 50 میکرولیتر برای آزمایش مصرف کنید
ضریب رقیق سازی: 25
6. روش های الایزا
6.1 دستورالعمل
1)قبل از استفاده، معرفهای الایزا را به دمای اتاق (20 تا 25 درجه سانتیگراد) برسانید.
2)معرف های ELISA را بلافاصله پس از استفاده به دمای 2-8 ℃ برگردانید
3)تکرارپذیری ELISA در فرآیند تجزیه و تحلیل تا حد زیادی به قوام صفحه شستشو بستگی دارد، عملکرد صحیح صفحه شستشو نقطه تعیین برنامه الایزا است.
4)در تمام فرآیندهای جوجه کشی با دمای ثابت، از قرار گرفتن در معرض نور خودداری کنید، میکروپلیت را با غشای پوششی ببندید.
6. 2 روش عملیات
1)کیت تست را برای حداقل 30 دقیقه به دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) بیاورید، توجه داشته باشید که هر معرف باید قبل از استفاده به طور یکنواخت تکان داده شود.
2)نوارهای ریز چاهک مورد نیاز را در قاب های صفحه قرار دهید.میکروپلیت استفاده نشده را مجدداً مهر و موم کنید، در دمای 2-8 ℃ نگهداری شود، یخ زده نباشد.
3)آماده سازی محلول: 15 میلی لیتر بافر شستشوی غلیظ 20× را بردارید، با آب یونیزه شده در 1:19 حل کنید (1 قسمت 20× بافر غلیظ شستشو + 19 قسمت آب دیونیزه) یا به مقدار لازم آماده کنید.
4)شماره گذاری: ریز چاه ها را بر اساس نمونه ها و محلول استاندارد شماره گذاری کنید.هر نمونه و محلول استاندارد باید در دو نسخه انجام شود.موقعیت های خود را ثبت کنند.
5)اضافه کردن استاندارد/نمونه: 50 میکرولیتر از نمونه یا محلول استاندارد را به چاهک های تکراری جداگانه اضافه کنید، سپس آنزیم مزدوج را 50 میکرولیتر در چاه اضافه کنید.سپس محلول کار آنتی بادی، 50 میکرولیتر در چاه.با تکان دادن دستی صفحه را به آرامی مخلوط کنید، میکروپلیت را با غشای پوششی ببندید، در 25 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه در تاریکی انکوبه کنید.
6)میکروپلیت را بشویید: غشای پوشش را با دقت باز کنید، مایع را از ریز چاه بریزید.250 میکرولیتر در چاه بافر شستشو اضافه کنید، 4 تا 5 بار، هر بار 15 تا 30 ثانیه به طور کامل بشویید، سپس بیرون بیاورید و با کاغذ جاذب بپوشانید تا خشک شود. (از نیزه استفاده نشده برای سوراخ کردن حباب پس از خشک شدن استفاده کنید)
7)رنگ آمیزی: 50 میکرولیتر از محلول بستر A و سپس 50 میکرولیتر محلول B به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن دستی بشقاب را به آرامی مخلوط کرده و در دمای 25 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه در تاریکی قرار دهید تا رنگ شود.
8)تعیین: 50 میکرولیتر از محلول توقف را به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن دستی صفحه را به آرامی مخلوط کنید.برای تعیین مقدار OD هر چاهک، طول موج میکروپلیت خوان را روی 450 نانومتر تنظیم کنید.(توصیه می شود مقدار OD را در طول موج دوگانه 450/630 نانومتر در عرض 5 دقیقه بخوانید).
7. قضاوت نتیجه
دو روش برای قضاوت در مورد نتایج وجود دارد.اولی قضاوت تقریبی است، در حالی که دومی تعیین کمی است.توجه داشته باشید که مقدار OD نمونه با Trichothecenes (T-2) در نمونه همبستگی منفی دارد.
7.1 تعیین کیفی
محدوده غلظت (ppb) را می توان با مقایسه میانگین مقدار جذب با استانداردها به دست آورد.فرض کنید مقدار جذب نمونه اول 0.3، نمونه دوم 1.0 و استانداردها عبارتند از: 0ppb از 2.243;0.05ppb از 1.816;0.15ppb از 1.415;0.45ppb از 0.74;1.35ppb از 0.313;4.05ppb از 0.155.سپس غلظت نمونه یک در محدوده 1.35ppb ~ 4.05ppb است.نمونه دوم 0.15ppb ~ 0.45ppb است.محدوده غلظت Trichothecenes (T-2) در نمونه ها را می توان با ضرب در رقت متناظر نمونه بدست آورد.
7. 2 تجزیه و تحلیل کمی
برای محاسبه غلظت نمونه ها باید یک منحنی استاندارد ایجاد کرد.قبل از ایجاد منحنی استاندارد، مفهوم درصد جذب باید شناخته شود.
محاسبه درصد جذب:
| درصد مقدار جذب = | ب | × 100% |
| B0 |
ب - مقدار متوسط OD نمونه یا محلول استاندارد
B0 - مقدار متوسط OD محلول استاندارد 0ng/mL
بنابراین استاندارد صفر برابر با 100% ساخته شده و مقادیر جذب به صورت درصد ذکر شده است.مقادیر محاسبه شده برای استانداردها در یک سیستم مختصات بر روی کاغذ گراف نیمه لگاریتمی در برابر غلظت تریکوتسن (T-2) [ng/mL] وارد می شود.غلظت Trichothecenes (T-2) در نانوگرم بر میلی لیتر مربوط به جذب هر نمونه را می توان از منحنی کالیبراسیون خواند.
یک نرم افزار ویژه برای تجزیه و تحلیل نتایج ELISA تعیین دو یا چندگانه را تسهیل می کند.در صورت نیاز لطفا برای درخواست تماس بگیرید.
8. اقدامات احتیاطی
1)دمای اتاق زیر 25 ℃ یا دمای معرف ها و بازگرداندن نمونه ها به دمای اتاق (20-25 ℃) منجر به کاهش استاندارد OD می شود.
2)خشکی میکروپلیت در فرآیند شستشو با شرایطی از جمله منحنی های استاندارد غیر خطی و تکرارپذیری نامطلوب همراه خواهد بود.بنابراین بلافاصله پس از شستشو به مرحله بعدی ادامه دهید.
3)قبل از افزودن هر معرف به طور یکنواخت مخلوط کنید.
4)محلول توقف محلول اسید سولفوریک 2 مولار است، از تماس با پوست خودداری کنید.
5)از کیت بیش از تاریخ انقضای آن استفاده نکنید.استفاده از معرف های رقیق شده یا تقلبی از کیت ها منجر به تغییر در حساسیت و تشخیص مقادیر OD می شود.معرف ها را از کیت های شماره های مختلف برای استفاده تعویض نکنید.
6)ذخیره سازی: در دمای 2 تا 8 ℃، یخ زده نگهداری شود.میکروپلیت استفاده نشده را در یک کیسه آب بندی خودکار قرار دهید تا دوباره آب بندی شود.ماده استاندارد و رنگ بی رنگ حساس به نور است و بنابراین نمی توان آنها را مستقیماً در معرض نور قرار داد.
7)محلول رنگ آمیزی را با هر رنگی که نشان دهنده انحطاط این محلول است دور بریزید.مقدار تشخیص (450/630nm) محلول استاندارد 0 (0 ppb) کمتر از 0.5 ((A450nm<0.5)) نشان دهنده انحطاط آن است.
8) دمای واکنش بهینه 25 درجه سانتیگراد است و دمای بسیار بالا یا خیلی پایین منجر به تغییرات در حساسیت تشخیص و مقادیر OD می شود.
9. تاریخ نگهداری و انقضا
ذخیره سازی: در دمای 2 تا 8 ℃، یخ زده نگهداری شود.
تاریخ انقضا: 12 ماه;تاریخ تولید روی جعبه درج شده است
توجه: اگر بسته خلاء میکروپلیت نشتی داشته باشد، استفاده از آن همچنان معتبر است، در نتیجه آزمایش تأثیری نداشته باشید، برای استفاده راحت باشید.
Q1: چقدر طول می کشد تا شما ارسال کنید؟
A1: معمولا ظرف 7 روز کاری ارسال می شود.
Q2: آیا از OEM/ODM پشتیبانی می کنید؟
A2: قابل پشتیبانی است.ما می توانیم با توجه به نیازهای خاص و مقادیر خاص شما سفارشی کنیم.
Q3: کارخانه شما از نظر کنترل کیفیت چگونه است؟
A3: ما دارای گواهینامه ISO9001 و گواهینامه ISO13485 هستیم، تا کنون تمام مراحل تولید، ما قوانین استانداردی داریم، ما از رفتار و قوانین مربوطه دولت پیروی می کنیم.
Q4: آیا خدمات پس از فروش تضمین شده است؟
A4: ما خدمات پس از فروش فنی آنلاین حرفه ای را ارائه می دهیم.اگر محصول در طول آزمایش شکست بخورد، می توانیم ارائه دهیم
راهنمایی یک به یک از طریق تلفن، ویدئو و سایر اشکال.
Q5: حداقل مقدار سفارش شما چقدر است؟
A5: 1 کیت.
Q6: روش حمل و نقل چیست؟
A6: می توان آن را از طریق اکسپرس (FEDEX، UPS، DHL، EMS، و غیره) یا از طریق هوا و زمین ارسال کرد. لطفاً قبل از سفارش با ما تأیید کنید.