به بهبود ادامه دهید
| محل منبع: | چین |
|---|---|
| نام تجاری: | Green Spring |
| گواهی: | ISO13485,ISO9001 |
| شماره مدل: | LSY-10004 |
| مقدار حداقل تعداد سفارش: | 1 کیت |
| قیمت: | negotiable |
| زمان تحویل: | 7 تا 14 روز |
| شرایط پرداخت: | T/T |
| قابلیت ارائه: | 100000 تست در روز |
| اندازه: | 16.7 * 11.5 * 10.2 سانتی متر | ماندگاری: | 12 ماه |
|---|---|---|---|
| کلید واژه ها: | کیت تست Nitrofuran SEM ELISA | مشخصات: | 96 چاه / کیت |
| عملکرد نمونه: | ماهی، میگو، مرغ/جگر، عسل، تخم مرغ، شیر | تایپ کنید: | کیت تست سریع ایمنی مواد غذایی |
| حساسیت (ppb): | 0.02 ppb | زمان جوجه کشی: | 30 دقیقه تا 15 دقیقه |
| برجسته کردن: | کیت تست ایمنی غذای گرین اسپرینگ,کیت تست ایمنی مواد غذایی 0.02 ppb,تست سنجش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم 15 دقیقه |
||
کیت تست ایمنی مواد غذایی Nitrofuran SEM ELISA برای حساسیت شیر 0.02ppb 96Wells/Kit
1. اصل کیت تست ایمنی مواد غذایی Nitrofuran SEM ELISA
این کیت تست بر اساس آنزیم ایمونواسی رقابتی برای تشخیص نیتروفوران (SEM) در نمونه است.آنتی ژن های جفت کننده از قبل روی نوارهای ریز چاه پوشیده شده اند.نیتروفوران (SEM) در نمونه و آنتی ژن های جفت کننده از پیش پوشش داده شده بر روی نوارهای چاه میکرو برای آنتی بادی های ضد SEM رقابت می کنند.پس از افزودن آنزیم مزدوج، بستر TMB برای رنگ‌آمیزی اضافه می‌شود.مقدار چگالی نوری (OD) نمونه با SEM موجود در آن همبستگی منفی دارد.این مقدار با منحنی استاندارد مقایسه می شود و غلظت SEM متعاقباً به دست می آید.
2. مشخصات فنی
حساسیت: 0.02ppb
دمای جوجه کشی: 25 ℃
زمان جوجه کشی: 30 دقیقه تا 15 دقیقه
حد تشخیص بافت، تخم مرغ، عسل: 0.1ppb
نرخ واکنش متقاطع
SEM 100%
AMOZ < 0.1٪
AOZ < 0.1٪
AHD < 0.1٪
نرخ بازیابی
بافت 25±75 درصد
عسل 70±20%
تخم مرغ 25±95 درصد
3. اجزای کیت تست ایمنی مواد غذایی Nitrofuran SEM ELISA
| 1 | نوارهای میکرو چاه |
12 نوار با 8 نوار قابل جدا شدن چاه هر کدام |
|
| 2 | 6× محلول استاندارد (هر یک میلی لیتر) | 0ppb | 0.02ppb |
| 0.06ppb | 0.18ppb | ||
| 0.54ppb | 1.62ppb | ||
| 3 | مزدوج آنزیمی | 7 میلی لیتر | کلاه قرمز |
| 4 | محلول کار آنتی بادی | 7 میلی لیتر | کلاه آبی |
| 5 | بستر A | 7 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 6 | بستر B | 7 میلی لیتر | کلاه سیاه |
| 7 | راه حل را متوقف کنید | 7 میلی لیتر | کلاه زرد |
| 8 | بافر شستشوی غلیظ 20× | 40 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 9 | 2× محلول حل مجدد غلیظ | 50 میلی لیتر | کلاه شفاف |
| 10 | 2-نیتروبنزلدئید (C7H5NO3) | 10 میلی لیتر | کلاه سیاه |
4. مواد مورد نیاز اما ارائه نشده است
1) تجهیزات: میکروپلیت خوان، چاپگر، هموژنایزر، دستگاه خشک کن نیتروژن، گرداب، سانتریفیوژ، پیپت های اندازه گیری، تعادل (حساسیت متقابل 0.01 گرم)، انکوباتور، حمام آب.
2) میکروپیپتورها: تک کانال 20-200 میکرولیتر، 100-1000 میکرولیتر و چند کانال 30 تا 300 میکرولیتر.
3) معرفها: NaOH، اتیل استات، n-هگزان، HCI (تقریباً 36.5٪)، K2HPO4·3H2O.
5. نمونه قبل از درمان
دستورالعمل ها
نکات زیر باید قبل از انجام پیش درمان هر نوع نمونه رعایت شود:
1) فقط نوک های یکبار مصرف را می توان برای آزمایش ها استفاده کرد و هنگام استفاده برای جذب معرف های مختلف، نوک ها باید تغییر کنند.
2) قبل از انجام آزمایش، هر یک از تجهیزات آزمایشی باید تمیز باشد و در صورت لزوم باید مجدداً تمیز شوند تا از آلودگی هایی که با نتایج آزمایش تداخل می کند جلوگیری شود.
آماده سازی محلول قبل از پیش تیمار نمونه:
1) 0.1 مولار K2HPO4: 11.4 گرم K2HPO4·3H2O را در آب دیونیزه شده تا 500 میلی لیتر حل کنید.
2) 1 مولار هیدروکلراید: 6/8 میلی لیتر HCI (تقریباً 5/36 درصد) را در آب دیونیزه شده تا 100 میلی لیتر حل کنید.
3) 1 مولار NaOH: 4 گرم NaOH را در آب یونیزه شده تا 100 میلی لیتر حل کنید.
4) محلول 2× انحلال مجدد غلیظ با آب دیونیزه به نسبت 1:1 (1 میلی لیتر محلول حل مجدد غلیظ + 1 میلی لیتر آب دیونیزه) رقیق می شود که برای حل مجدد نمونه استفاده می شود.
5.1 آماده سازی نمونه ها
الف) بافت، تخم مرغ
1) 0.05 ± 1 گرم از نمونه همگن شده را وزن کنید، 4 میلی لیتر آب مقطر، 0.5 میلی لیتر HCI 1 مولار و 100 میکرولیتر 2-نیتروبنزلدئید (C7H5NO3) به هر لوله اضافه کنید، به مدت 2 دقیقه به خوبی تکان دهید.
2) در 37 ℃ در طول شب (تقریباً 16 ساعت) یا در 56 درجه سانتیگراد با حمام آب (2 ساعت) انکوبه کنید.
3) 5 میلی لیتر 0.1 مولار K2HPO4، 0.4 میلی لیتر NaOH 1 مولار و 6 میلی لیتر اتیل استات به هر لوله اضافه کنید، به مدت 30 ثانیه تکان دهید.
4) در دمای بالاتر از 4000r/min در دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید (اگر امولسیوناسیون وجود دارد یا لایه اتیل استات برای 3 میلی لیتر کافی نیست، نمونه را در حمام آب 80 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه انکوبه کنید و مکررا سانتریفیوژ کنید؛ یا سرعت را افزایش دهید. و افزایش زمان سانتریفیوژ).
5) 3 میلی لیتر از لایه اتیل استات را به یک لوله گریز از مرکز جدید منتقل کنید و با نیتروژن یا هوا در دمای 50 درجه سانتیگراد تا خشک شدن تبخیر کنید.
6) باقیمانده های خشک را در 2 میلی لیتر N-هگزان حل کنید، 1 میلی لیتر از محلول حل کننده مجدد رقیق شده را اضافه کنید، به مدت 30 ثانیه به درستی مخلوط کنید، با سرعت بالای 4000 r/min در دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید.فاز N-هگزان لایه بالا را بردارید (در صورت وجود امولسیون، پس از برداشتن فاز N-هگزان لایه بالا، نمونه را در حمام آب 70 درجه سانتیگراد به مدت 10-20 دقیقه انکوبه کنید، به طور مکرر سانتریفیوژ کنید).
7) 50 میکرولیتر از پایین را برای تجزیه و تحلیل بردارید.
تا رقت نمونه: 2
ب) عسل
1) 0.05 ± 2 گرم از نمونه همگن شده (عسل) را وزن کنید، 4 میلی لیتر آب مقطر، 0.5 میلی لیتر HCI 1 مولار و 100 میکرولیتر 2-نیتروبنزلدئید (C7H5NO3) به هر لوله اضافه کنید، به مدت 2 دقیقه به خوبی تکان دهید.
2) در 37 ℃ در طول شب (تقریباً 16 ساعت) یا در 56 درجه سانتیگراد با حمام آب (2 ساعت) انکوبه کنید.
3) 5 میلی لیتر 0.1 مولار K2HPO4، 0.4 میلی لیتر NaOH 1 مولار و 6 میلی لیتر اتیل استات به هر لوله اضافه کنید، به مدت 30 ثانیه تکان دهید.
4) در دمای بالاتر از 4000r/min در دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید (اگر امولسیون وجود دارد یا لایه اتیل استات برای 3 میلی لیتر کافی نیست، نمونه را در حمام آب 80 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه انکوبه کنید و مکررا سانتریفیوژ کنید؛ یا سرعت را افزایش دهید. و افزایش زمان سانتریفیوژ).
5) 3 میلی لیتر از لایه اتیل استات را به یک لوله گریز از مرکز جدید منتقل کنید و با نیتروژن یا هوا در دمای 50 درجه سانتیگراد تا خشک شدن تبخیر کنید.
6) باقیمانده های خشک را در 2 میلی لیتر N-هگزان حل کنید، 1 میلی لیتر از محلول حل مجدد رقیق شده را اضافه کنید، به مدت 30 ثانیه به درستی مخلوط کنید، با سرعت بالای 4000r/min در دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید.فاز N-هگزان لایه بالا را بردارید (در صورت وجود امولسیون، پس از برداشتن فاز N-هگزان لایه بالا، نمونه را در حمام آب 70 درجه سانتیگراد به مدت 10-20 دقیقه انکوبه کنید، به طور مکرر سانتریفیوژ کنید).
7) 50 میکرولیتر از پایین را برای تجزیه و تحلیل بردارید.
تا رقت نمونه: 1
6. روش های الایزا
6.1 دستورالعمل
1) قبل از استفاده همه معرف ها و نوارهای ریز چاه را به دمای اتاق (20-25 ℃) برسانید.
2) بلافاصله پس از استفاده تمام معرف ها را به 2-8 ℃ برگردانید.
3) تکرارپذیری آنالیز ELISA تا حد زیادی به قوام شستشوی صفحه بستگی دارد.عملکرد صحیح شستشوی صفحه نکته کلیدی در روش های الایزا است.
4) برای انکوباسیون در دمای ثابت، تمام نمونه ها و معرف ها باید از قرار گرفتن در معرض نور اجتناب کنند و هر میکروپلیت باید توسط غشای پوششی مهر و موم شود.
6.2 رویه های عملیاتی
1) کیت را حداقل به مدت 30 دقیقه در دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) قرار دهید، توجه داشته باشید که هر معرف قبل از استفاده باید تکان داده شده و به خوبی مخلوط شود و نوارهای میکرووله مورد نیاز را در قاب صفحه قرار دهید.میکروپلیت های استفاده نشده باید دوباره بسته شوند و در دمای 8-2 درجه سانتیگراد نگهداری شوند، نه منجمد.
2) آماده سازی محلول: 40 میلی لیتر از بافر شستشوی 20× غلیظ را بردارید و آن را با آب دیونیزه به نسبت 1:19 رقیق کنید (1 قسمت بافر شستشوی 20× غلیظ + 19 قسمت آب دیونیزه).یا در صورت نیاز آماده کنید.
3) شماره گذاری: ریز چاه ها را با توجه به نمونه ها و محلول های استاندارد شماره گذاری کنید.هر نمونه و محلول استاندارد باید در دو نسخه ساخته شود و موقعیت آنها باید ثبت شود.
4) 50 میکرولیتر نمونه یا محلول استاندارد را به چاه های تکراری اضافه کنید.50 میکرولیتر از آنزیم مزدوج را به هر چاهک اضافه کنید، سپس 50 میکرولیتر محلول آنتی بادی را اضافه کنید و صفحه را تکان دهید تا به آرامی مخلوط شود.میکروپلیت را با یک فیلم پوششی ببندید و به مدت 30 دقیقه در دمای 25 درجه سانتیگراد انکوبه کنید.
5) مایع را در ریز چاه ها ریخته، روی کاغذ جاذب خشک کنید، 250 میکرولیتر در چاه بافر شستشو اضافه کنید تا صفحه میکرووله به مدت 15 تا 30 ثانیه بشویید، سپس خارج کرده و با کاغذ جاذب خشک کنید، 4 تا 5 بار تکرار کنید.(اگر بعد از ضربه زدن حباب های هوا وجود داشت، آنها را با نوک تمیز قطع کنید).
6) توسعه رنگ: 50 میکرولیتر از بستر A و 50 میکرولیتر از بستر B را به هر چاهک اضافه کنید.بشقاب را با دست تکان دهید تا به آرامی مخلوط شود و در دمای 25 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه در تاریکی قرار دهید تا رنگ ایجاد شود.
7) سنجش: 50 میکرولیتر محلول توقف را به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن بشقاب با دست به آرامی مخلوط کنید.برای تعیین مقدار OD هر چاهک، طول موج میکروپلیت خوان را روی 450 نانومتر تنظیم کنید.(توصیه می شود مقدار OD را در طول موج دوگانه 450/630 نانومتر در عرض 5 دقیقه بخوانید).
7. قضاوت نتیجه
دو روش برای قضاوت در مورد نتایج وجود دارد: اولی قضاوت تقریبی و دومی تعیین کمی است.توجه داشته باشید که مقدار OD نمونه با محتوای SEM همبستگی منفی دارد.
7.1 تعیین کیفی
محدوده غلظت (ng/mL) را می توان از مقایسه میانگین مقدار OD نمونه با محلول استاندارد بدست آورد.با فرض اینکه مقدار OD نمونهⅠ 0.3 و مقدار نمونهⅡ 1.0ppb باشد، مقدار OD محلول های استاندارد است: 2.243 برای 0ppb، 1.816 برای 0.02ppb، 1.415 برای 0.06ppb، 0.184 برای 0.06ppb، 0.184 ppb برای 0.0. ppb، 0.155 برای 1.62ppb، بر این اساس محدوده غلظت نمونه Ⅰ 0.54 تا 1.62ppb و نمونه Ⅱ 0.06 تا 0.18ppb است.
7.2 تعیین کمی
مقادیر متوسط مقادیر جذب برای میانگین مقدار OD (B) نمونه و محلول استاندارد تقسیم بر مقدار OD (B0) اولین محلول استاندارد (0 استاندارد) بدست می آید و متعاقباً در 100٪ ضرب می شود. ،
| درصد مقدار جذب = | ب | × 100% |
| B0 |
B-میانگین (چاهک دوگانه) مقدار OD نمونه یا محلول استاندارد
B0 - مقدار متوسط OD محلول استاندارد 0ng/mL
منحنی استاندارد را با درصد جذب محلول استاندارد و مقادیر نیم لگاریتمی محلول استاندارد SEM (ng/mL) به ترتیب به عنوان محور Y و X رسم کنید.غلظت متناظر نمونه را از منحنی استاندارد با وارد کردن درصد جذب آن در منحنی استاندارد بخوانید.مقدار حاصل متعاقباً در برابر رقت مربوطه ضرب می شود و در نهایت غلظت SEM در نمونه بدست می آید.
8. اقدامات احتیاطی
1) اگر دمای اتاق کمتر از 25 درجه سانتیگراد باشد یا دمای معرف و نمونه به دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) برنگردد، مقدار استاندارد OD کاهش می یابد.
2) در طول فرآیند شستشو، خشک شدن میکروپلیت با غیر خطی بودن منحنی استاندارد همراه خواهد بود و تکرارپذیری ایده آل نیست.بنابراین بلافاصله پس از شستشو به مرحله بعدی بروید.
3) خوب مخلوط کنید، در غیر این صورت تکرارپذیری ضعیف خواهد بود.
4) محلول استاپ محلول اسید سولفوریک 2 مولار است، از تماس پوستی خودداری کنید.
5) از کیت بیشتر از مدت زمان ماندگاری استفاده نکنید.استفاده از معرف های رقیق شده یا تقلبی از کیت می تواند منجر به تغییر در حساسیت و تشخیص مقادیر OD شود.معرف ها را در دسته های مختلف کیت ها جایگزین نکنید.
6) میکروپلیت های استفاده نشده را در کیسه های زیپلاک مجدد ببندید.محلول های استاندارد و کوپلرهای بی رنگ به نور حساس هستند و نمی توان آنها را مستقیماً در معرض نور قرار داد.
7) هر محلول رنگی که رنگ آن نشان دهنده تحلیل رفتن محلول باشد دور بریزید.مقدار تشخیص کمتر از 0.5 برای محلول استاندارد 1 (0 ppb) نشان دهنده تخریب است.
8) دمای واکنش بهینه 25 درجه سانتیگراد است و حساسیت تشخیص و مقدار OD در صورتی که دما خیلی زیاد یا خیلی کم باشد تغییر می کند.
9. تاریخ نگهداری و انقضا
نحوه نگهداری: در دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد نگهداری شود، از یخ زدن خودداری شود.
تاریخ انقضا: 12 ماه;تاریخ تولید روی جعبه درج شده است.
توجه: اگر بسته بندی خلاء میکروپلیت نشتی داشته باشد، همچنان می توان از آن بدون تأثیر بر نتایج آزمایش استفاده کرد، بنابراین می توانید با اطمینان از آن استفاده کنید.
Q1: چه زمانی ارسال می شود؟
A1: ما کالا را در اسرع وقت ظرف 7 روز کاری پس از دریافت پرداخت برای شما ارسال می کنیم.(در صورت وجود عوامل خارجی مانند اپیدمی، ممکن است زایمان به تاخیر بیفتد)
Q2: آیا از OEM/ODM پشتیبانی می کند؟
A2: می توان آن را پشتیبانی کرد، اما مقدار خاص باید بیش از 100000 قطعه باشد، که برای محصولات سفارشی مناسب است.
Q3: کارخانه شما از نظر کنترل کیفیت چگونه است؟
A3: ما گواهینامه ملی ISO9001 و ISO13485 را داریم.فرآیند تولید ما مطابق با روش های استاندارد برای اطمینان از کیفیت مطلوب محصول است.
Q4: چگونه خدمات پس از فروش را ارائه دهیم؟
A4: ما خدمات پس از فروش فنی آنلاین حرفه ای را ارائه می دهیم.ما می توانیم از طریق ویدئو، تلفن و غیره به شما راهنمایی های تک به تک ارائه دهیم.
Q5: روش پرداخت چیست؟
A5: ما پرداخت را توسط T/T دریافت می کنیم.
Q6: چگونه حمل کنیم؟
A6: بهترین روش حمل و نقل را با دریافت قیمت از بسیاری از شرکت های حمل و نقل تعاونی ما انتخاب کنید و همچنین مطابق با نیاز خود ارسال کنید.