به بهبود ادامه دهید
| محل منبع: | چین |
|---|---|
| نام تجاری: | Green Spring |
| گواهی: | ISO13485,ISO9001 |
| شماره مدل: | LSY-10003 |
| مقدار حداقل تعداد سفارش: | 1 کیت |
| قیمت: | negotiable |
| زمان تحویل: | 7 تا 14 روز |
| شرایط پرداخت: | T/T |
| قابلیت ارائه: | 100000 تست در روز |
| اندازه: | 16.7 * 11.5 * 10.2 سانتی متر | ماندگاری: | 12 ماه |
|---|---|---|---|
| کلید واژه ها: | کیت تست Nitrofuran AHD ELISA | مشخصات: | 96 چاه / کیت |
| عملکرد نمونه: | ماهی، میگو، مرغ/جگر، عسل، تخم مرغ، شیر | تایپ کنید: | کیت تست سریع ایمنی مواد غذایی |
| حساسیت (ppb): | 0.04 ppb | زمان جوجه کشی: | 30 دقیقه تا 15 دقیقه |
| برجسته کردن: | آنتی بادی کیت تست سریع نیتروفوران,آنتی بادی کیت تست سریع AHD,کیت تست کیفیت شیر 0.04ppb |
||
کیت تست ایمنی مواد غذایی Nitrofuran AHD ELISA برای حساسیت شیر 0.04ppb 96Wells/Kit
1.کیت تست ایمنی مواد غذایی Nitrofuran AHD ELISAاصل
این کیت تست بر اساس آنزیم ایمونواسی رقابتی برای تشخیص آمینوهیدانتیون (AHD) در نمونه است.آنتی ژن های جفت کننده از قبل روی نوارهای ریز چاه پوشیده شده اند.آمینوهیدانتیون (AHD) در نمونه و آنتی ژن های جفت شده از پیش پوشش داده شده بر روی نوارهای ریز چاهک برای آنتی بادی های ضد AHD رقابت می کنند.پس از افزودن آنزیم مزدوج، بستر TMB برای رنگ‌آمیزی اضافه می‌شود.مقدار چگالی نوری (OD) نمونه با AHD در آن همبستگی منفی دارد.این مقدار با منحنی استاندارد مقایسه شده و غلظت AHD متعاقباً بدست می آید.
2.کیت تست ایمنی مواد غذایی Nitrofuran AHD ELISAمشخصات فنی
حساسیت: 0.04ppb
دمای جوجه کشی: 25 ℃
زمان جوجه کشی: 30 دقیقه تا 15 دقیقه
حد تشخیص بافت، تخم مرغ، عسل: 0.1ppb
نرخ واکنش متقاطع
AHD 100%
AMOZ < 0.1٪
AOZ < 0.1٪
SEM <0.1٪
نرخ بازیابی
بافت، تخم مرغ 25±95 درصد
عسل 25±75 درصد
3. اجزاء
| 1 | نوارهای میکرو چاه |
12 نوار با 8 نوار قابل جدا شدن چاه هر کدام |
|
| 2 | 6× محلول استاندارد (هر یک میلی لیتر) | 0ppb | 0.04ppb |
| 0.12ppb | 0.36ppb | ||
| 1.08ppb | 3.24ppb | ||
| 3 | مزدوج آنزیمی | 7 میلی لیتر | کلاه قرمز |
| 4 | محلول کار آنتی بادی | 7 میلی لیتر | کلاه آبی |
| 5 | بستر A | 7 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 6 | بستر B | 7 میلی لیتر | کلاه سیاه |
| 7 | راه حل را متوقف کنید | 7 میلی لیتر | کلاه زرد |
| 8 | بافر شستشوی غلیظ 20× | 40 میلی لیتر | کلاه سفید |
| 9 | 2× محلول حل مجدد غلیظ | 50 میلی لیتر | کلاه شفاف |
| 10 | 2-نیتروبنزلدئید (C7H5NO3) | 10 میلی لیتر | کلاه سیاه |
4. مواد مورد نیاز اما ارائه نشده است
1) تجهیزات: میکروپلیت خوان، چاپگر، هموژنایزر، دستگاه خشک کن نیتروژن، گرداب، سانتریفیوژ، پیپت های اندازه گیری، تعادل (حساسیت متقابل 0.01 گرم)، انکوباتور، حمام آب.
2) میکروپیپتورها: تک کانال 20-200 میکرولیتر، 100-1000 میکرولیتر و چند کانال 30 تا 300 میکرولیتر.
3) معرف ها: NaOH، اتیل استات، n-هگزان، HCI (تقریباً 36.5٪)، K2HPO4·3H2O
5. نمونه قبل از درمان
دستورالعمل ها
نکات زیر باید قبل از انجام پیش درمان هر نوع نمونه رعایت شود:
1) فقط نوک های یکبار مصرف را می توان برای آزمایش ها استفاده کرد و هنگام استفاده برای جذب معرف های مختلف، نوک ها باید تغییر کنند.
2) قبل از انجام آزمایش، هر یک از تجهیزات آزمایشی باید تمیز باشد و در صورت لزوم باید مجدداً تمیز شوند تا از آلودگی هایی که با نتایج آزمایش تداخل می کند جلوگیری شود.
آماده سازی محلول قبل از پیش تیمار نمونه:
الف) 0.1 مولار K2HPO4: 11.4 گرم K2HPO4·3H2O را در آب دیونیزه شده تا 500 میلی لیتر حل کنید.
ب) 1 مولار هیدروکلراید: 6/8 میلی لیتر HCI (تقریباً 5/36 درصد) را در آب دیونیزه شده تا 100 میلی لیتر حل کنید.
ج) 1 مولار NaOH: 4 گرم NaOH را در آب یونیزه شده تا 100 میلی لیتر حل کنید.
د) محلول حل مجدد غلیظ 2 با آب دیونیزه به نسبت 1:1 (1 میلی لیتر محلول حل مجدد غلیظ + 1 میلی لیتر آب دیونیزه) رقیق می شود که برای حل مجدد نمونه استفاده می شود.
5.1 آماده سازی نمونه ها
الف) بافت، تخم مرغ
1) 0.05 ± 1 گرم از نمونه همگن شده را وزن کنید، 4 میلی لیتر آب مقطر، 0.5 میلی لیتر HCI 1 مولار و 100 میکرولیتر 2-نیتروبنزلدئید (C7H5NO3) به هر لوله اضافه کنید، به مدت 2 دقیقه به خوبی تکان دهید.
2) در 37 ℃ در طول شب (تقریباً 16 ساعت) یا در 56 درجه سانتیگراد با حمام آب (2 ساعت) انکوبه کنید.
3) 5 میلی لیتر 0.1 مولار K2HPO4، 0.4 میلی لیتر NaOH 1 مولار و 6 میلی لیتر اتیل استات به هر لوله اضافه کنید، به مدت 30 ثانیه تکان دهید.
4) در دمای بالاتر از 4000r/min در دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید (اگر امولسیوناسیون وجود دارد یا لایه اتیل استات برای 3 میلی لیتر کافی نیست، نمونه را در حمام آب 80 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه انکوبه کنید و مکررا سانتریفیوژ کنید؛ یا سرعت را افزایش دهید. و افزایش زمان سانتریفیوژ).
5) 3 میلی لیتر از لایه اتیل استات را به یک لوله گریز از مرکز جدید منتقل کنید و با نیتروژن یا هوا در دمای 50 درجه سانتیگراد تا خشک شدن تبخیر کنید.
6) باقیمانده های خشک را در 2 میلی لیتر N-هگزان حل کنید، 1 میلی لیتر از محلول حل کننده مجدد رقیق شده را اضافه کنید، به مدت 30 ثانیه به درستی مخلوط کنید، با سرعت بالای 4000 r/min در دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید.فاز N-هگزان لایه بالا را بردارید (در صورت وجود امولسیون، پس از برداشتن فاز N-هگزان لایه بالا، نمونه را در حمام آب 70 درجه سانتیگراد به مدت 10-20 دقیقه انکوبه کنید، به طور مکرر سانتریفیوژ کنید).
7) 50 میکرولیتر از پایین را برای تجزیه و تحلیل بردارید.
تا رقت نمونه: 2
ب) عسل
1) 0.05 ± 2 گرم از نمونه همگن شده (عسل) را وزن کنید، 4 میلی لیتر آب مقطر، 0.5 میلی لیتر HCI 1 مولار و 100 میکرولیتر 2-نیتروبنزلدئید (C7H5NO3) به هر لوله اضافه کنید، به مدت 2 دقیقه به خوبی تکان دهید.
2) در 37 ℃ در طول شب (تقریباً 16 ساعت) یا در 56 درجه سانتیگراد با حمام آب (2 ساعت) انکوبه کنید.
3) 5 میلی لیتر 0.1 مولار K2HPO4، 0.4 میلی لیتر NaOH 1 مولار و 6 میلی لیتر اتیل استات به هر لوله اضافه کنید، به مدت 30 ثانیه تکان دهید.
4) در دمای بالاتر از 4000r/min در دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید (اگر امولسیون وجود دارد یا لایه اتیل استات برای 3 میلی لیتر کافی نیست، نمونه را در حمام آب 80 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه انکوبه کنید و مکررا سانتریفیوژ کنید؛ یا سرعت را افزایش دهید. و افزایش زمان سانتریفیوژ).
5) 3 میلی لیتر از لایه اتیل استات را به یک لوله گریز از مرکز جدید منتقل کنید و با نیتروژن یا هوا در دمای 50 درجه سانتیگراد تا خشک شدن تبخیر کنید.
6) باقیمانده های خشک را در 2 میلی لیتر N-هگزان حل کنید، 1 میلی لیتر از محلول حل مجدد رقیق شده را اضافه کنید، به مدت 30 ثانیه به درستی مخلوط کنید، با سرعت بالای 4000r/min در دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید.فاز N-هگزان لایه بالا را بردارید (در صورت وجود امولسیون، پس از برداشتن فاز N-هگزان لایه بالا، نمونه را در حمام آب 70 درجه سانتیگراد به مدت 10-20 دقیقه انکوبه کنید، به طور مکرر سانتریفیوژ کنید).
7) 50 میکرولیتر از پایین را برای تجزیه و تحلیل بردارید.
تا رقت نمونه: 1
6. روش های الایزا
6.1 دستورالعمل
1) قبل از استفاده همه معرف ها و نوارهای ریز چاه را به دمای اتاق (20-25 ℃) برسانید.
2) بلافاصله پس از استفاده تمام معرف ها را به 2-8 ℃ برگردانید.
3) تکرارپذیری آنالیز ELISA تا حد زیادی به قوام شستشوی صفحه بستگی دارد.عملکرد صحیح شستشوی صفحه نکته کلیدی در روش های الایزا است.
4) برای انکوباسیون در دمای ثابت، تمام نمونه ها و معرف ها باید از قرار گرفتن در معرض نور اجتناب کنند و هر میکروپلیت باید توسط غشای پوششی مهر و موم شود.
6.2 رویه های عملیاتی
1) کیت تست را به مدت حداقل 30 دقیقه به دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) برسانید، توجه داشته باشید که هر معرف باید قبل از استفاده تکان داده شود تا به طور یکنواخت مخلوط شود، نوارهای میکرو چاه مورد نیاز را در قاب های صفحه قرار دهید.میکروپلیت استفاده نشده را دوباره مهر و موم کنید، در دمای 2-8 ℃ نگهداری کنید، یخ زده نشوید.
2) آماده سازی محلول: 40 میلی لیتر از بافر شستشوی غلیظ 20× را با آب دیونیزه در 1:19 رقیق کنید (1 قسمت 20 × بافر شستشو غلیظ + 19 قسمت آب یونیزه شده).یا در صورت نیاز آماده کنید.
3) شماره گذاری: ریز چاه ها را با توجه به نمونه ها و محلول استاندارد شماره گذاری کنید.هر نمونه و محلول استاندارد باید در دو نسخه انجام شود، موقعیت آنها را ثبت کنید.
4) 50 میکرولیتر از نمونه یا محلول استاندارد را به چاهک های تکراری جداگانه اضافه کنید.50 میکرولیتر از مزدوج آنزیم و سپس 50 میکرولیتر از محلول عامل آنتی بادی را به هر چاه اضافه کنید، با تکان دادن دستی صفحه را به آرامی مخلوط کنید.میکروپلیت را با غشای پوششی ببندید و در دمای 25 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه انکوبه کنید.
5) مایع را از ریز چاه بریزید، روی کاغذ جاذب ببندید تا خشک شود، 250 میکرولیتر در چاه بافر شستشو را برای شستشوی میکروپلیت به مدت 15 تا 30 ثانیه اضافه کنید، سپس خارج کرده و با کاغذ جاذب بپوشانید تا خشک شود، 4 تا 5 بار تکرار کنید.(اگر بعد از زدن حباب ها وجود داشت، آنها را با نوک تمیز برش دهید).
6) رنگ: 50 میکرولیتر از بستر A و سپس 50 میکرولیتر از بستر B را به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن دستی بشقاب را به آرامی مخلوط کنید، سپس در دمای 25 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه در تاریکی برای رنگ آمیزی انکوبه کنید.
7) تعیین: 50 میکرولیتر از محلول توقف را به هر چاهک اضافه کنید.با تکان دادن دستی صفحه را به آرامی مخلوط کنید.طول موج میکروپلیت خوان را روی 450 نانومتر تنظیم کنید تا مقدار OD هر چاه را تعیین کنید.(توصیه می شود مقدار OD را در طول موج دوگانه 450/630 نانومتر در عرض 5 دقیقه بخوانید).
7. قضاوت نتیجه
دو روش برای قضاوت در مورد نتایج وجود دارد: اولی قضاوت تقریبی و دومی تعیین کمی است.توجه داشته باشید که مقدار OD نمونه با محتوای AHD همبستگی منفی دارد.
7.1 تعیین کیفی
محدوده غلظت (ng/mL) را می توان از مقایسه میانگین مقدار OD نمونه با محلول استاندارد بدست آورد.با فرض اینکه مقدار OD نمونهⅠ 0.3 و مقدار نمونه Ⅱ 1.0ppb باشد، مقدار OD محلول های استاندارد است: 2.243 برای 0ppb، 1.816 برای 0.04ppb، 1.415 برای 0.12ppb، 0.314 برای 0.310ppb، 0.314 برای 0.0. ppb، 0.155 برای 3.24ppb، بر این اساس محدوده غلظت نمونه Ⅰ 1.08 تا 3.24ppb و نمونه Ⅱ 0.12 تا 0.36ppb است.
7.2 تعیین کمی
مقادیر متوسط مقادیر جذب برای میانگین مقدار OD (B) نمونه و محلول استاندارد تقسیم بر مقدار OD (B0) اولین محلول استاندارد (0 استاندارد) بدست می آید و متعاقباً در 100٪ ضرب می شود. ،
| درصد مقدار جذب = | ب | × 100% |
| B0 |
B-میانگین (چاهک دوگانه) مقدار OD نمونه یا محلول استاندارد
B0 - مقدار متوسط OD محلول استاندارد 0ng/mL
منحنی استاندارد را با درصدهای جذب محلول استاندارد و مقادیر نیم لگاریتمی محلول استاندارد AHD (ng/mL) به ترتیب به عنوان محور Y و X رسم کنید.غلظت متناظر نمونه را از منحنی استاندارد با وارد کردن درصد جذب آن در منحنی استاندارد بخوانید.مقدار حاصل متعاقباً در برابر رقت مربوطه ضرب می شود و در نهایت غلظت AHD در نمونه بدست می آید.
8. اقدامات احتیاطی
1) دمای اتاق کمتر از 25 درجه سانتیگراد است یا دمای معرف و نمونه به دمای اتاق (20-25 درجه سانتیگراد) بر نمی گردد، که باعث کاهش مقدار استاندارد OD می شود.
2) در طول فرآیند شستشو، خشک شدن میکروپلیت با غیر خطی بودن منحنی استاندارد و تکرارپذیری نامطلوب همراه خواهد بود.بنابراین بلافاصله پس از شستشو به مرحله بعدی بروید.
3) خوب مخلوط کنید، در غیر این صورت تکرارپذیری ضعیفی وجود خواهد داشت.
4) محلول استاپ محلول اسید سولفوریک 2 مولار است، از تماس با پوست خودداری کنید.
5) از کیت بیشتر از تاریخ انقضا استفاده نکنید.استفاده از معرف های رقیق شده یا تقلبی از کیت می تواند منجر به تغییر در حساسیت و تشخیص مقادیر OD شود.معرف ها را در دسته های مختلف کیت ها جایگزین نکنید.
6) میکروپلیت های استفاده نشده را در کیسه های خود آب بندی مجدد ببندید.محلول های استاندارد و کوپلرهای بی رنگ به نور حساس هستند و نمی توان آنها را مستقیماً در معرض نور قرار داد.
7) محلول رنگی که رنگ آن نشان دهنده تحلیل رفتن محلول باشد را دور بریزید.مقدار تشخیص کمتر از 0.5 برای محلول استاندارد 1 (0 ppb) نشان دهنده تخریب است.
8) دمای واکنش بهینه 25 درجه سانتیگراد است و حساسیت تشخیص و مقدار OD در صورتی که دما خیلی زیاد یا خیلی کم باشد تغییر می کند.
9. تاریخ نگهداری و انقضا
ذخیره سازی: در دمای 2 تا 8 ℃، یخ زده نگهداری نشود.
تاریخ انقضا: 12 ماه;تاریخ تولید روی جعبه درج شده است
توجه: اگر بسته خلاء میکروپلیت نشتی داشته باشد، استفاده از آن همچنان معتبر است، در نتیجه آزمایش تأثیری نداشته باشید، برای استفاده راحت باشید.
Q1: چه زمانی ارسال می شود؟
A1: ما کالا را در اسرع وقت ظرف 7 روز کاری پس از دریافت پرداخت برای شما ارسال می کنیم.(در صورت اپیدمی و سایر عوامل خارجی، ممکن است تاخیر در حمل و نقل وجود داشته باشد)
Q2: آیا از OEM/ODM پشتیبانی می کند؟
A2: می توان آن را پشتیبانی کرد، اما مقدار خاص باید بیش از 100000 قطعه باشد تا محصولات سفارشی را تسهیل کند.
Q3: کارخانه شما از نظر کنترل کیفیت چگونه است؟
A3: ما دارای گواهی ISO9001 و ISO13485 توسط دولت هستیم.فرآیند تولید ما مطابق با فرآیند استاندارد است که می تواند کیفیت محصولات بهینه را تضمین کند.
Q4: خدمات پس از فروش چگونه ارائه می شود؟
A4: ما خدمات پس از فروش فنی آنلاین حرفه ای را ارائه می دهیم.ما می توانیم به صورت تک به تک به شما در قالب تماس های تصویری، تلفنی و غیره راهنمایی کنیم.
Q5: روش پرداخت چیست؟
A5: ما پرداخت را توسط T/T دریافت می کنیم.
Q6: چگونه حمل کنیم؟
A6: با دریافت قیمت از بسیاری از شرکت های حمل و نقل تعاونی ما، بهترین راه را برای حمل و نقل برای خود انتخاب کنید، یا می توانید طبق نیاز خود حمل کنید.