کیت های تشخیص دامپزشکی نشخوارکنندگان کوچک PPRV Ab ELISA کیت برای گوسفند

کیت‌های تشخیصی دامپزشکی نشخوارکنندگان کوچک PPRV Ab ELISA برای گوسفند

 

Peste Des Petits Ruminants Virus (PPRV) Ab ELISA کیت برای گوسفند 96 Wells/Kit

 

1. استفاده

برای تشخیص کیفی آنتی بادی PPRV در سرم و پلاسمای گوسفند و بز، ارزیابی وضعیت ایمنی واکسن Peste des petits نشخوارکنندگان و کمک به تشخیص سرولوژیکی حیوانات آلوده استفاده می شود.

2. اصل

این کیت با استفاده از روش ELISA رقابتی، آنتی ژن PPRV روی نوارهای میکرو چاه آنزیمی از قبل پوشش داده شده است.هنگام آزمایش، نمونه سرم رقیق شده و کونژوگه آنزیم مونوکلونال را اضافه کنید، پس از انکوباسیون، اگر آنتی بادی اختصاصی ویروس PPR وجود داشته باشد، به آنتی ژن PPRV روی صفحه پوشش متصل می شود و از اتصال آنتی بادی مونوکلونال نشاندار شده با آنزیم به آنتی ژن روی پلیت جلوگیری می کند. ;برعکس، اگر نمونه حاوی آنتی بادی اختصاصی PPRV نباشد، به صفحه پوشش متصل نخواهد شد.پس از شستشو برای حذف آنتی بادی غیر متصل و سایر اجزاء، سوبسترا را به ریز چاهک ها اضافه کنید تا از طریق کاتالیز آنزیمی یک محصول آبی تشکیل شود.پس از افزودن محلول توقف برای پایان دادن به واکنش، از یک میکروپلیت خوان با طول موج دوگانه 450 نانومتر/630 نانومتر برای اندازه گیری مقدار جذب A در چاه واکنش استفاده کنید.

3. اجزای کیت

 

1	میکروپلیت پوشش داده شده با آنتی ژن PPRV	96T X 2
2	مزدوج آنزیمی	12 میلی لیتر	درب زرد
3	رقیق سازی نمونه	25 میلی لیتر	درب شفاف
4	سرم کنترل منفی PPRV-IgG	1 میلی لیتر	درب سبز
5	سرم کنترل مثبت PPRV-IgG	1 میلی لیتر	درب قرمز
6	لایه	12 میلی لیتر X2	درب نارنجی
7	راه حل را متوقف کنید	12 میلی لیتر	درب آبی
8	10× بافر شستشو غلیظ	50 میلی لیتر	درب سفید
9	فویل چسب	2 عدد
10	دستورالعمل	1 قطعه

 

4. مواد مورد نیاز ارائه نشده است

1) میکروپیپت: 0.5-10ul، 10ul-100ul، 100ul-1000ul.
2) نوک پیپت یکبار مصرف.
3) فارغ التحصیل: 500 میلی لیتر.
4) میکروپلیت ریدر: 96 چاه با طول موج 450/630 نانومتر.
5) آب مقطر یا آب دیونیزه.
6) میکروپلیت واشر

5. آماده سازی نمونه

خون کامل حیوان را بگیرید، سرم را به روش معمول دریافت کنید، سرم باید روشن و بدون همولیز باشد.

6. آماده سازی بافر شستشو

بافر شستشوی غلیظ 10 برابری را قبل از استفاده به دمای اتاق برگردانید، در صورت وجود کریستال نمک، آن را به مدت 5 تا 10 دقیقه در حمام آب 37 درجه سانتیگراد قرار دهید تا حل شود، سپس آن را با آب دیونیزه 10 بار رقیق کنید (مثلاً برای تهیه شستشوی 200 میلی لیتری). بافر: 180 میلی لیتر آب دیونیزه + 20 میلی لیتر بافر شستشو غلیظ 10X، آن را به طور یکنواخت مخلوط کنید.بافر شستشوی رقیق شده را می توان حدود یک هفته در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری کرد.
 

7. یادداشت ها

1) تمام معرف ها را قبل از استفاده به دمای اتاق برگردانید، همه معرف ها را حداقل 30 دقیقه در دمای اتاق قرار دهید.قبل از استفاده آن را به طور یکنواخت تکان دهید و پس از استفاده به دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد برگردید.
2) معرف های استفاده از کیت های مختلف و تعداد لات های مختلف را مخلوط نکنید، از آلوده شدن معرف ها در هنگام استفاده جلوگیری کنید.
3) بستر و محلول استاپ ممکن است باعث تحریک پوست و چشم شود، در مصرف احتیاط کنید.
4) بستر را در معرض نور شدید قرار ندهید و از تماس با اکسیدان خودداری کنید.
5) صفحات پوشش داده شده PPRV-Ag باید آب بندی و ضد رطوبت باشند.بشقاب MicroWell استفاده نشده را در کیسه فویل خشک برگردانید و در دمای 2-8 ℃ مهر و موم کنید.
6) قبل از دور ریختن باید با تمام زباله ها به خوبی برخورد شود تا از آلودگی جلوگیری شود.
7) رعایت دقیق دستورالعمل های عملیاتی می تواند بهترین نتایج را به دست آورد.عملیات لوله گذاری، زمان بندی و شستشوی کل فرآیند باید دقیق باشد.

8. روش تست

1) میکروپلیت از قبل روکش شده را بردارید (با توجه به تعداد نمونه ها می توان آن را جدا کرد و به طور جداگانه استفاده کرد)، 2 چاه برای کنترل مثبت، 2 چاه برای کنترل منفی تنظیم کنید، 50 میکرولیتر سرم کنترل مثبت یا سرم کنترل منفی را به چاه اضافه کنید. بر این اساس؛بقیه به خوبی نمونه می شوند، ابتدا 40 میکرولیتر رقت نمونه اضافه کنید، سپس 10 میکرولیتر نمونه را به هر چاه اضافه کنید.در نهایت، 50 میکرولیتر آنزیم مزدوج را به هر چاه اضافه کنید، به آرامی تکان دهید تا به طور یکنواخت مخلوط شود، صفحه را با فویل چسب بپوشانید، در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه انکوبه کنید.
2) فویل چسب را باز کنید، مایع چاه را دور بریزید، بافر شستشوی رقیق شده را به هر چاهک اضافه کنید، 300 لیتر در چاه، 30 ثانیه ساکن باشد، سپس مایع را دور بریزید، مرحله بالا را 5 بار تکرار کنید، در آخر فلپ خشک شود. کاغذ جاذب؛
3) محلول بستر را 100 لیتر در چاه اضافه کنید، آن را به طور مساوی مخلوط کنید سپس آن را با فویل چسب بپوشانید، در دمای 37 درجه در تاریکی به مدت 15 دقیقه انکوبه کنید.
4) محلول توقف را 50 لیتر در چاه اضافه کنید تا واکنش متوقف شود، نتیجه را در 10 دقیقه اندازه گیری کنید.

9. قضاوت نتایج

مقدار OD را با ELISA Reader در 450nm (630nm به عنوان مرجع) بخوانید.
برای اینکه سنجش معتبر باشد:
مقدار OD کنترل منفی (N)≥1.0،
مقدار OD کنترل مثبت (P) ≤0.3;
روش محاسبه:
مقدار نمونه OD/میانگین مقدار OD کنترل منفی (N)= مقدار S/N
تفسیر نتایج
مقدار S/N≥0.5: منفی
مقدار S/N<0.5: مثبت

10. تاریخ نگهداری و انقضا

در دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد در تاریکی، بدون یخ زدگی، تاریخ انقضا: 12 ماه نگهداری شود.

 

 

علائم بالینی

1. حادترین نوع

در بزها رایج است.پس از یک دوره کمون متوسط ​​2 روزه، دمای بدن به طور ناگهانی به 40-41 درجه یا حتی 42 درجه افزایش می یابد، همراه با افسردگی، موهای زائد و از دست دادن یا از بین رفتن اشتها.در عین حال، اشک و مخاط سروز بینی وجود دارد.التهاب کاتارال دهان، گاهی اوقات زخم مخاط یا مرگ قبل از وقوع.با این حال، پرخونی دندان m شایع است.اول یبوست، سپس اسهال شدید، اما بدون مدفوع خونی.از نارسایی گوسفند، کاهش دما و مرگ ناگهانی رنج می برد.دوره بیماری 5 تا 6 روز است و میزان بروز آن به 100٪ می رسد.در صورت شیوع جدی، میزان مرگ و میر 100٪ است.در موارد خفیف، میزان مرگ و میر از 50٪ تجاوز نمی کند.عملکرد گوسفندان جوان شدید، با میزان بروز و تلفات بالا است.

2. نوع حاد

دوره کمون 3 تا 4 روز است و علائم آن مانند حادترین علائم است، اما دوره بیماری طولانی تر است، بنابراین شیره سروز و لزج بینی به حالت مخاطی تبدیل می شود و سوراخ های بینی به زودی مسدود می شود.غشاهای مخاطی زبان، گونه، فک بالا و حلق زخمی به نظر می رسند.اغلب استوماتیت نکروزان وجود دارد.در موارد خفیف، کانون های نکروز سطحی قرمز کوچک ظاهر می شود و در موارد شدید، کل حفره دهان تحت تأثیر قرار می گیرد.گوسفند مریض تشنه است و غذا نمی خورد.اسهال جت مداوم رخ می دهد.اگر مشکل تنفس و سرفه دارید، نشان دهنده عفونت تنفسی است.واژینال واژینیت اغلب در میش ها رخ می دهد که با ترشح مخاطی چرکی همراه است.گوسفند آبستن می تواند باعث سقط جنین شود.دوره بیماری 8-10 روز است.برخی بر اثر بیماری همزمان مردند، برخی بهبود یافتند و برخی مزمن شدند.

3. نوع تحت حاد یا مزمن

بعد از مرحله حاد شایع است.علائم اولیه مشابه موارد فوق است.ندول ها و اسکارهای چرکی در اطراف دهان و سوراخ های بینی و همچنین یقه تحتانی از علائم خاص مرحله اواخر این نوع هستند که به راحتی با اسکارهای چرکی عفونی اشتباه گرفته می شوند.دوره بیماری 10-15 روز است.گوسفندها معمولاً روند تحت حاد را نشان می دهند و سپس بهبود می یابند یا علائمی را نشان نمی دهند.

 

 

 

 

Q1: چقدر طول می کشد تا شما ارسال کنید؟
A1: معمولا ظرف 7 روز کاری ارسال می شود.

 

Q2: آیا از OEM/ODM پشتیبانی می کنید؟
A2: قابل پشتیبانی است.ما می توانیم با توجه به نیازهای خاص و مقادیر خاص شما سفارشی کنیم.

 

Q3: کارخانه شما از نظر کنترل کیفیت چگونه است؟
A3: ما دارای گواهینامه ISO9001 و گواهینامه ISO13485 هستیم، تا کنون تمام مراحل تولید، ما قوانین استانداردی داریم، ما از رفتار و قوانین مربوطه دولت پیروی می کنیم.

 

Q4: آیا خدمات پس از فروش تضمین شده است؟
A4: ما خدمات پس از فروش فنی آنلاین حرفه ای را ارائه می دهیم.اگر محصول در طول آزمایش شکست بخورد، می توانیم ارائه دهیم
راهنمایی یک به یک از طریق تلفن، ویدئو و سایر اشکال.

 

Q5: حداقل مقدار سفارش شما چقدر است؟
A5: 1 کیت.

 

Q6: روش حمل و نقل چیست؟
A6: می توان آن را از طریق اکسپرس (FEDEX، UPS، DHL، EMS، و غیره) یا از طریق هوا و زمین ارسال کرد. لطفاً قبل از سفارش با ما تأیید کنید.